[发明专利]一种来源于黑孢块菌的耐锌镉基因TmZRC1S及应用

权利要求书

1.一种来源于黑孢块菌的耐锌镉基因TmZRC1S，其核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示。

2.含有权利要求1所述耐锌镉基因TmZRC1S的重组表达载体。

3.根据权利要求2所述的重组表达载体，其特征在与，所述重组表达载体还包括双35S启动子、GUS报告基因和带内含子卡那霉素抗性标记基因。

4.如权利要求1所述来源于黑孢块菌的耐锌镉基因TmZRC1S在培育耐锌镉植物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述耐锌镉植物为拟南芥。

6.一种将所述来源于黑孢块菌的耐锌镉基因TmZRC1S转入拟南芥中的方法，包括如下步骤：

1）重组表达载体BH440的构建

利用BamHI和SacI对PCR产物进行双酶切后，通过T4DNA连接酶将本发明合成的TmZRC1S基因与含有双35S启动子的植物表达载体pCAMBIA-1301连接，酶切鉴定和序列测定获得了含有目的基因TmZRC1S的重组表达载体BH440；

2）电击法转化农杆菌

利用电击法将构建好的重组表达载体BH440导入根癌农杆菌中，所述根癌农杆菌菌株为LBA4404；

3）农杆菌蘸花法转化拟南芥

利用农杆菌蘸花法将导入TmZRC1S基因的根癌农杆菌转化到拟南芥中，利用潮霉素进行转化植株筛选，将在潮霉素板上正常生长的小苗进行移苗，收种，进行阳性苗鉴定。