[发明专利]一种高动态范围的多重数字PCR芯片及其制备方法

权利要求书

1.一种高动态范围的多重数字PCR芯片，其中，该芯片包括从下至上依次粘合的基底层、腔室层、支撑层和封口层；

其中所述腔室层包括：

一级进样口；

多个检测区域，所述检测区域包括：

蛇形通道，所述蛇形通道的一端与所述一级进样口相连通；

二级进样口，所述二级进样口的一端与所述蛇形通道的另一端相连通；

主通道，所述主通道的一端与所述二级进样口的另一端相连通；

反应单元，所述反应单元至少具有四种不同体积的腔室，所述腔室均接入所述主通道；以及

出样口，所述出样口与所述主通道的另一端相连通。

2.根据权利要求1所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片，所述反应单元具有四种不同体积的腔室，四种腔室直径分别为100μm、400μm、800μm和1200μm，高为100μm。

3.根据权利要求2所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片，直径为100μm的腔室有1656个，直径为400μm的腔室有360个，直径为800μm的腔室有288个，直径为1200μm的腔室有360个。

4.根据权利要求1所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片，单个所述检测区域的进样体积是10μL。

5.根据权利要求1所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片，每个所述检测区域具有六组反应单元。

6.根据权利要求1所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片，所述主通道由四段宽度不同的子通道连接而成，一段所述子通道和一种所述腔室一一对应。

7.根据权利要求1所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片，所述四段宽度不同的子通道沿样品流动方向依次增大。

8.根据权利要求7所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片，所述四段宽度不同的子通道分别为50μm、100μm、200μm、300μm。

9.根据权利要求1所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片，所述腔室层和支撑层均由聚二甲基硅氧烷制作而成，所述腔室层和基底层通过不可逆等离子体键合。

10.根据权利要求1所述的一种高动态范围的多重数字PCR芯片的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)准备干净的4英寸硅片；

(2)采用标准软光刻法制作腔室层模具；

(3)将模具用脱模剂进行旋涂处理，通风干燥；

(4)配制A：B＝5：1的PDMS并浇注在腔室层模具上，加热固化后形成腔室层；

(5)配制A：B＝10：1的PDMS并浇注在腔室层上，固化后形成支撑层；

(6)将不同比例的PDMS加热后粘在一起，将固化后的PDMS脱模并用打孔器进行打孔，形成进出样口；

(7)通过等离子体处理将腔室层与基底进行封接；

(8)在支撑层上贴一层封口层，密封进出样口。