[发明专利]一种基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 202110880439.8 申请日: 2021-08-02
公开(公告)号: CN113637659B 公开(公告)日: 2023-10-03
发明(设计)人: 张敏;钱锴钺;王永中;盛康亮;王明珠 申请(专利权)人: 安徽大学
主分类号: C12N9/24 分类号: C12N9/24;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/47;A61P1/04;C12R1/19
代理公司: 合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙) 34146 代理人: 洪玲
地址: 230000 安徽省合肥*** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 一种 基因工程 制备 艾克曼菌 乙酰 糖苷酶 amuc_2109 蛋白 及其 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白,其特征在于,具有如下序列中任意一种:

(1)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;

(2)具有(1)的氨基酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸序列获得的氨基酸序列,且与(1)的氨基酸序列具有同等功能的同源蛋白序列。

2.根据权利要求1所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白,其特征在于,所述具有(1)的氨基酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸序列获得的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中,存在D246A、D62A、H163A、K162A、R132A、D247A中的一种或多种突变。

3.根据权利要求1所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白,其特征在于,编码所述蛋白的基因具有如SEIQ IN NO.2所示的核苷酸序列。

4.一种如权利要求1-3任一所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。

5.一种如权利要求1-3任一所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白在DSS诱导的结肠炎分子机制的应用。

6.一种如权利要求1-3任一所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白的制备方法,其特征在于,步骤包括:

步骤S1、以A.muciniphila的cDNA为模板,通过PCR扩增技术获得Amuc_2109蛋白的基因,将其基因构建在pET-22b载体上,获得Amuc_2109重组质粒。

步骤S2、利用大肠杆菌原核表达系统表达Amuc2109重组质粒,并利用Ni-NTA柱和亲和层析纯化获得艾克曼菌Amuc_2109蛋白。

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