[发明专利]一种基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白及其制备方法和应用有效
申请号: | 202110880439.8 | 申请日: | 2021-08-02 |
公开(公告)号: | CN113637659B | 公开(公告)日: | 2023-10-03 |
发明(设计)人: | 张敏;钱锴钺;王永中;盛康亮;王明珠 | 申请(专利权)人: | 安徽大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/47;A61P1/04;C12R1/19 |
代理公司: | 合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙) 34146 | 代理人: | 洪玲 |
地址: | 230000 安徽省合肥*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基因工程 制备 艾克曼菌 乙酰 糖苷酶 amuc_2109 蛋白 及其 方法 应用 | ||
1.一种基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白,其特征在于,具有如下序列中任意一种:
(1)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;
(2)具有(1)的氨基酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸序列获得的氨基酸序列,且与(1)的氨基酸序列具有同等功能的同源蛋白序列。
2.根据权利要求1所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白,其特征在于,所述具有(1)的氨基酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸序列获得的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中,存在D246A、D62A、H163A、K162A、R132A、D247A中的一种或多种突变。
3.根据权利要求1所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白,其特征在于,编码所述蛋白的基因具有如SEIQ IN NO.2所示的核苷酸序列。
4.一种如权利要求1-3任一所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。
5.一种如权利要求1-3任一所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白在DSS诱导的结肠炎分子机制的应用。
6.一种如权利要求1-3任一所述的基因工程制备的艾克曼菌乙酰己糖苷酶Amuc_2109蛋白的制备方法,其特征在于,步骤包括:
步骤S1、以A.muciniphila的cDNA为模板,通过PCR扩增技术获得Amuc_2109蛋白的基因,将其基因构建在pET-22b载体上,获得Amuc_2109重组质粒。
步骤S2、利用大肠杆菌原核表达系统表达Amuc2109重组质粒,并利用Ni-NTA柱和亲和层析纯化获得艾克曼菌Amuc_2109蛋白。
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