[发明专利]白头翁皂苷B4雾化吸入制剂及应用

说明书

本发明公开了一种白头翁皂苷B4雾化吸入制剂，所述雾化吸入制剂包括B4溶液或B4纳米制剂。B4溶液将白头翁皂苷B4溶解在生理盐水中，B4纳米制剂包括：将白头翁皂苷B4用乙醇配制成浓度为2.5‑10mg/mL的溶液，置于常温环境，得到B4乙醇溶液，将吐温80用水配制成质量分数为0.02％的溶液，置于0‑4℃冷藏，得到水相溶液；冰盐浴条件下，将B4乙醇溶液快速加入其20‑30倍体积的水相溶液，水相溶液搅拌速度保持在900‑2000r/min，搅拌时间不短于4min，析出的为药物纳米晶体。本发明通过与TNFR2蛋白和Foxp3蛋白结合，从而抑制TNFR2和Foxp3及Treg细胞发挥作用。

技术领域

本发明涉及医药技术领域。更具体地说，本发明涉及一种白头翁皂苷B4雾化吸入制剂及应用。

背景技术

白头翁是毛茛科白头翁属植物白头翁(Pulsatilla chinensis(Bunge)Regel)的干燥根，具有清热解毒、凉血止痢的功效。现代药理学研究表明，白头翁中皂苷类成分是其主要活性成分，具有增强免疫功能、抗炎等作用。白头翁皂苷B4是白头翁中提取具有药理活性的五环三萜类皂苷，其具有抗炎抗菌、免疫调节、抗氧化、抗病毒等药理作用。2015版《中国药典》一部白头翁含量测定项规定：白头翁皂苷B4含量不得少于4.6％。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种白头翁皂苷B4雾化吸入制剂及应用，其通过与TNFR2蛋白和Foxp3蛋白结合，从而抑制TNFR2和Foxp3及Treg细胞发挥作用。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种白头翁皂苷B4雾化吸入制剂，所述雾化吸入制剂包括B4溶液或B4纳米制剂。

优选的是，B4溶液的制备方法为：将白头翁皂苷B4溶解在生理盐水中，浓度达到5-25mg/mL。

优选的是，B4纳米制剂的制备方法为：

将白头翁皂苷B4用乙醇配制成浓度为2.5-10mg/mL的溶液，置于常温环境，得到B4乙醇溶液，将稳定剂用水配制成质量分数为0.01-0.03％的溶液，置于0-4℃冷藏，得到水相溶液；

冰盐浴条件下，将B4乙醇溶液快速加入其20-30倍体积的水相溶液，水相溶液搅拌速度保持在900-2000r/min，搅拌时间不短于4min，析出的为药物纳米晶体。

优选的是，得到的药物纳米晶体的粒径不大于1000nm。

优选的是，冰盐浴条件为-15℃，碎冰与NaCl以4:1重量比混合。

优选的是，水相溶液的初始温度为3℃。

优选的是，B4乙醇溶液的初始温度为20℃。

优选的是，水相溶液搅拌速度保持在1200r/min。

优选的是，B4乙醇溶液与水相溶液的体积比为1:30。

所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制剂作为TNFR2和Foxp3蛋白抑制剂的应用。

本发明至少包括以下有益效果：

第一、本发明进行体外实验：①计算机模拟白头翁皂苷B4(B4)与TNFR2结合力；②利用放线菌素D和TNF诱导WEHI-13var细胞检测B4对细胞死亡的保护作用；③将TNFR2报告基因质粒转入Jurkat细胞中，检测B4对TNFR2的影响；④从C57BL/6小鼠淋巴结分离T淋巴细胞，利用分选流式细胞仪筛选出CD4+Foxp3+双阳性细胞及Treg细胞，检测B4处理后对TGF-β和IL-10的影响；⑤检测B4对A549细胞的杀伤作用；⑥将TNFR2转染A549细胞，检测B4对TNFR2的影响。