[发明专利]化学发光化学传感器的制作及用于有机磷类农药的检测

权利要求书

1.化学发光化学传感器的制作，其特征在于，包括化学发光标记合成物、标记物的洗脱和纯化以及待测样本发光动力测定三个部分，制作过程使用的设备为光致电离传感器，其中化学发光标记合成物部分中的有效成分为毒死蟀、二嗪农、乙拌磷、对硫磷等硫代磷酸酯类农药中的共有成分0,0-二乙基硫代磷酰氯，其中待测样本发光动力测定部分中包含有有机磷农药受测样本溶液和抗有机磷农药多克隆抗体；

化学发光的反应公式为：化学发光标记合成物+有机磷农药受测样本溶液+抗有机磷农药多克隆抗体＝复合物；

化学传感器的机理：通过光致电离传感器测量出复合物的发光强度，以复合物的发光强度判断；

有机磷农药受测样本溶液中包含有农田土壤样本萃取液、农田水分萃取液和农作物萃取液。

2.根据权利要求1所述的化学发光化学传感器的制作，其特征在于，所述复合物生产量与有机磷农药受测样本溶液添加量呈线性关系，有机磷农药受测样本溶液添加量越多，化学发光标记合成物生产量越低，化学发光的反应公式中添加比例为：有机磷农药受测样本溶液∶化学发光标记合成物＝0.5∶1。

3.根据权利要求1所述的化学发光化学传感器的制作，其特征在于，所述化学发光标记合成物部分中，包括如下步骤：

S1：取鲁米诺溶于干燥的二氯甲烷中，加入三乙胺，进行冰浴，缓慢滴入0,0-二乙基硫代磷酰氯，自然升温至室温，搅拌8h,倾入质量分数为1％的盐酸溶液中，分出有机层，再用二氯甲烷萃取水层，合并有机相，最后用蒸馏水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥，高真空旋蒸近干；

S2：以S1步骤中添加顺序为基础，并设置0,0-二乙基硫代磷酰氯的浓度梯度，0,0-二乙基硫代磷酰氯的浓度梯度设为正常浓度组T1、低于正常浓度组T2和高于正常浓度组T3；

S3：结合S2步骤的浓度梯度T1、T2和T3，合成标记物A1、标记物A2和标记物A3。

4.根据权利要求1所述的化学发光化学传感器的制作，其特征在于，所述标记物的洗脱和纯化过程中，包括如下步骤：

M1：选取乙酸乙酯和石油醚体系的层析液，并按照不同配比比例配置乙酸乙酯和石油醚；

M2：选取S3步骤中其中一种的标记物产物，按照不同配比比例进行薄层层析实验，得出最佳RF值的配比比例。

5.根据权利要求4所述的化学发光化学传感器的制作，其特征在于，所述标记物的洗脱和纯化过程中，还包括如下步骤：

N1：以M2步骤中最佳RF值的层析液，对标记物进行层析，分离出粗产物；

N2：以N1步骤中的粗产物为基础，通过涂布法对粗产物进行再处理，得到纯化后的标记物A1-1、标记物A2-1和标记物A3-1。

6.根据权利要求1所述的化学发光化学传感器的制作，其特征在于，所述待测样本发光动力测定部分中，包括如下步骤：

Z1：分别取鲁米诺溶液和化学发光标记合成物A1-1、A2-1和A3-1溶液，用0.01moVL的碳酸盐缓冲液定容进行混合，混合溶液为B1、B2和B3，碳酸盐缓冲液的pH为9.6；

Z2：分别取混合溶液为B1、B2和B3按照统一的体积加入到测量杯中，以光致电离传感器，记录动态曲线；

Z3：以标记物A1-1、A2-1和A3-1的动态曲线为基础，分别将混合溶液B1、B2和B3的动态曲线结合在标记物A1-1、A2-1和A3-1的动态曲线中，以此来判断计算不同有机磷农药受测样本溶液中有机磷类残留量。

7.根据权利要求1-5任一项所述的用于有机磷类农药的检测，其特征在于，有机磷类农药的检测内容包括有农田土壤有机磷残留量、农田水分有机磷残留量和农作物有机磷残留量。