[发明专利]D-甘露糖异构酶固定化酶及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种D-甘露糖异构酶(简称MIase)固定化酶，其特征在于，包括酶载体和MIase。

2.根据权利要求1所述的MIase固定化酶，其特征在于，所述MIase与酶载体的酶活质量比(U/g)为(800-2500)：1，优选为(1000-2000):1。

3.根据权利要求1所述的MIase固定化酶，其特征在于，所述酶载体为大孔树脂；所述酶载体与MIase通过共价键或离子吸附的方式结合在一起。

4.根据权利要求1所述的MIase固定化酶，其特征在于，所述酶载体为中性或弱碱性大孔树脂，优选为中性大孔树脂。

5.根据权利要求1所述的MIase固定化酶，其特征在于，所述酶载体为聚丙烯酸类大孔树脂或聚苯乙烯类大孔树脂，优选为聚丙烯酸类大孔树脂。

6.根据权利要求1所述的MIase固定化酶，其特征在于，所述酶载体为带有疏水性骨架或亲水性骨架的聚丙烯酸类大孔树脂或聚苯乙烯类大孔树脂，优选为带有亲水性骨架的聚丙烯酸类大孔树脂。

7.根据权利要求1所述的MIase固定化酶，其特征在于，所述酶载体选自带有环氧基团或胺基基团的聚丙烯酸类大孔树脂或聚苯乙烯类大孔树脂；优选为带有环氧基团的聚丙烯酸类大孔树脂。

8.根据权利要求1所述的MIase固定化酶，其特征在于，所述MIase固定化酶的酶活为250U/g～650U/g，优选为500U/g～650U/g。

9.一种MIase固定化酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将MIase酶液与酶载体混合，摇床振荡，形成混合液，弃去所述混合液的上层液体，洗涤所述混合液的下层固体，从而得到MIase固定化酶。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述摇床振荡的时间为10～36h，优选为12～20h；

所述MIase与酶载体混合后，摇床振荡反应的温度为15～35℃，优选为20～25℃。

11.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述MIase固定化酶为权利要求1-8任一项所述的MIase固定化酶。

12.一种D-甘露糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将果糖水溶液通过装有MIase固定化酶的反应器中进行连续转化，得到含有D-甘露糖的溶液；

所述MIase固定化酶为权利要求1-8任一项所述的MIase固定化酶；

优选地，所述含有D-甘露糖的溶液，经连续色谱分离、浓缩脱色提纯，获得纯度为99％以上的D-甘露糖。