[发明专利]一种人白三烯受体CysLTR1 mRNA RT-PCR检测用引物探针组和试剂盒在审
申请号: | 202110890788.8 | 申请日: | 2021-08-04 |
公开(公告)号: | CN113564245A | 公开(公告)日: | 2021-10-29 |
发明(设计)人: | 刘奕;吴周杰;吴善东;蒋学翰;王教峰;雷薇;钱磊 | 申请(专利权)人: | 杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 310052 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 白三烯 受体 cysltr1 mrna rt pcr 检测 引物 探针 试剂盒 | ||
1.一种人白三烯受体CysLTR1 mRNA RT-PCR检测用引物探针组,其特征在于,所述引物探针组包括引物CysLTR1-F、引物CysLTR1-R和探针C1-Probe,所述引物CysLTR1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述引物CysLTR1-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述探针C1-Probe的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述的引物探针组,其特征在于,所述探针C1-Probe的5'端标记荧光报告基团,3'端标记淬灭基团。
3.根据权利要求1所述的引物探针组,其特征在于,还包括内参基因的引物GAPDH-F、引物GAPDH-R和探针G-Probe,所述引物GAPDH-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,所述引物GAPDH-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示,所述探针G-Probe的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
4.根据权利要求3所述的引物探针组,其特征在于,所述探针G-Probe的5'端标记荧光报告基团,3'端标记淬灭基团;探针G-Probe标记的荧光报告基团与探针C1-Probe不同标记的荧光报告基团。
5.根据权利要求2或4所述的引物探针组,其特征在于,所述荧光报告基团包括FAM或JOE,所述淬灭基团包括BHQ1。
6.一种人白三烯受体CysLTR1 mRNA RT-PCR检测用试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1~5任一项所述引物探针组、PCR反应液、酶混合液、CysLTR1标准品、ROX参比染料和无核酶水。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述PCR反应液包括dNTPmix、MgCl2和缓冲液。
8.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述酶混合液包括Taq酶、逆转录酶、RNA酶抑制剂和Taq酶抗体。
9.权利要求6、7或8所述试剂盒的使用方法,包括以下步骤:将引物探针组、PCR反应液、酶混合液、标准品或待测样品、ROX参比染料和无核酶水混合后,进行荧光定量扩增。
10.根据权利要求9所述的使用方法,其特征在于,以20μL计,所述试剂盒的反应体系包括:引物探针组2μL、PCR反应液10μL、酶混合液0.5μL、ROX参比染料0.1μL、标准品或待测样品5μL和无核酶水2.4μL;所述荧光定量扩增的条件为:42℃30min;95℃1min;95℃5s,60℃31s,扩增40个循环。
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