[发明专利]鞘氨醇杆菌SC015及其在制备诺如病毒吸附剂中的应用

说明书

本发明公开了一种鞘氨醇杆菌SC015及其在制备诺如病毒吸附剂中的应用，本发明的菌株SC015吸附诺如病毒的效率能够达到60％，而且对GII.4亚型的诺如病毒具有特异性。该菌对诺如病毒的吸附特异性，过滤吸附饮用水或生菜、草莓等鲜切果蔬中特定亚型诺如病毒，该技术能有效的预警并清除果蔬表面诺如病毒GII.4的污染，与现有技术(滤膜法)相比，提高了30％吸附效率，且具有吸附特异性(传统滤膜法无特异性)。

技术领域

本发明涉及一种诺如病毒吸附清除技术，特别涉及一株鞘氨醇杆菌SC015(Sphingobacterium sp.SC015)及其在吸附诺如病毒中的应用。

背景技术

诺如病毒(Norovirus，NoV)可感染人导致急性肠胃炎，因于1968年在美国俄亥俄州诺瓦克镇的腹泻暴发中被分离发现而得名，并于1972年由Kapikian首次检出。无论在发展中国家或是发达国家，NoV已公认是儿童和成人流行性或散发性胃肠炎最常见的病因。NoV是无包膜单股正链RNA病毒，属杯状病毒科，可分为GI～GV五个基因群(Genogroup)，其中引起人类感染的主要是GI和GII群。通过突变和重组，诺如病毒的基因组进行着快速的变异，表现出基因的多样化，从而导致新突变株的产生以及急性胃肠炎疾病的大暴发。NoV的感染性强，有报道表明，即使少于10²拷贝数/mL的NoV颗粒都可能导致感染。并且，NoV对环境具有较强的耐受性，在酸性 (pH 2.7)条件下、加热(60℃)条件及自来水中游离氯(3.75～6.25mg/L)浓度条件下仍具感染性，预防手段十分有限。

诺如病毒所引发的胃肠炎在世界各地广泛流行和暴发。如，美国每年有2300万例非细菌性急性胃肠炎由诺如病毒引起，占各种肠道传染病的60％，并常引起医院感染暴发。欧洲多国也有相关报道：1995～2000年期间85％以上的暴发性病毒性胃肠炎系诺如病毒所致。亚洲地区也存在诺如病毒胃肠炎暴发流行的情况。Hamano等报道日本Okay ama地区77％急性暴发性非细菌性胃肠炎与诺如病毒有关。我国对诺如病毒的研究起步较晚，自1995年报告首例诺如病毒感染病例后，国内许多地区多次暴发诺如病毒感染性急性胃肠炎。2000-2013年，我国涉及诺如病毒暴发疫情72起，累计报道病例11778例，平均164例/起，疫情暴发地主要集中于广东和浙江。诺如病毒可在所有年龄段、不同场所(幼儿园、学校、餐馆、夏令营、医院、护婴室、养老院、航海舰队和部队单位等)引起暴发，对社会造成的危害极大。如果没有及时有效的防治手段，将严重影响经济的发展和社会的稳定。

近年来的研究还发现，一些微生物细菌可以特异性的吸附或结合病毒。如，人肠道微生物菌群内细菌介导诺如病毒的感染作用。在人诺如病毒的感染中，组织血型抗原(HBGAs)起了重要的作用。以往的研究表明人诺如病毒的P2结构域存在一个特定的链接结构，通过这个结构病毒可以和红细胞、呼吸系统的黏膜上皮细胞、消化细胞和泌尿生殖道细胞表面的糖类结构结合，这些细胞表面的受体都被认为是HBGAs (主要包括H型、ABO血型和Lewis抗原)。最近的研究发现大量的革兰氏阴性菌同样可以表达HBGAs。诺如病毒能够依附于这些表达HBGAs的细菌。投射电子显微镜演示NoV病毒样颗粒(VLPs)主要附着于肠溶性菌株的胞外聚合物，而这些胞外聚合物也是类似于HBGAs样的分子。同样，在研究诺如病毒对果蔬等农产品的污染吸附过程中，Gao等人研究发现NoV GII.4型VLPs可以与生菜的细胞壁多糖结合，进一步分析表明该细胞壁多糖同样具有类似于HBGAs样的分子结构。Esseili等人还发现在不同的非生物逆境下(强光，紫外线，机械损伤，高温或低温，冷冻，水淹等条件)，采收前的生菜和菠菜叶鞘细菌的密度与诺如病毒的吸附有一定的相关性，这也暗示了植物共生微生物影响病毒污染吸附的可能。

本发明成功筛选到一株诺如病毒结合细菌(Sphingobacterium sp.)SC015(保藏号： CCTCC M 20191079)，并对其影响诺如病毒的污染、吸附、耐受性等特征开展了深入研究，同时对诺如病毒结合细菌表面HBGAs类似物的分离、解析工作，为未来食源性病毒预防和控制提供支持。

发明内容