[发明专利]尿源性干细胞捕获支架的制备方法、尿源性干细胞捕获支架及其应用

权利要求书

1.一种尿源性干细胞捕获支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.将细菌纤维素依次进行PEI溶液处理、肝素溶液处理和Ⅰ型胶原蛋白溶液处理；

b.循环所述肝素溶液处理和Ⅰ型胶原蛋白溶液处理1～5次；

c.将经过b步骤处理的细菌纤维素进行交联，然后吸附抗体制备得到尿源性干细胞捕获支架；

所述抗体特异性识别尿源性干细胞表面的抗原。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述细菌纤维素的来源包括醋酸胶膜杆菌发酵。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述PEI溶液处理的方式包括将细菌纤维素在PEI溶液中孵育；

所述PEI溶液包括含PEI的磷酸缓冲盐溶液；

所述PEI溶液中，PEI的浓度为2～4mg/mL；

在PEI溶液中孵育的时间为0.5～1.5h；

所述PEI溶液处理完成后还包括乙酸缓冲溶液冲洗步骤。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述肝素溶液处理的方式包括将细菌纤维素在肝素溶液中孵育；

所述肝素溶液包括含肝素的乙酸缓冲溶液；

所述肝素溶液中，肝素的浓度为0.5～2mg/mL；

在肝素溶液中孵育的时间为20～30min；

在肝素溶液中震荡孵育，震荡的转速为80～120rpm；

所述肝素溶液处理完成后还依次包括采用乙酸缓冲溶液冲洗和干燥步骤。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述Ⅰ型胶原蛋白溶液处理的方式包括将细菌纤维素在Ⅰ型胶原蛋白溶液中孵育；

所述Ⅰ型胶原蛋白溶液包括含Ⅰ型胶原蛋白的乙酸缓冲溶液；

所述Ⅰ型胶原蛋白溶液中，Ⅰ型胶原蛋白的浓度为0.5～2mg/mL；

在Ⅰ型胶原蛋白溶液中孵育的时间为15～30min；

在Ⅰ型胶原蛋白溶液中震荡孵育，震荡的转速为80～120rpm；

所述Ⅰ型胶原蛋白溶液处理完成后还依次包括采用乙酸缓冲溶液冲洗和干燥步骤。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述交联包括戊二醛交联；

将细菌纤维素在戊二醛溶液中交联；

所述戊二醛溶液包括含有戊二醛的磷酸缓冲溶液；

所述戊二醛溶液中戊二醛的质量浓度为0.2％～0.3％；

所述交联的时间为0.5～2h。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述抗体包括CD29、CD73、CD90、CD44或SSEA-4中的至少一种。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述吸附抗体的方式包括将细菌纤维素在抗体溶液中孵育；

所述抗体溶液包括含抗体的磷酸缓冲溶液；

所述抗体溶液中，抗体的浓度为15～25μg/mL；

在抗体溶液中孵育的时间为8～12h；

在抗体溶液中孵育的温度为3～5℃。

9.采用权利要求1-8任一项所述的制备方法制备得到的尿源性干细胞捕获支架。