[发明专利]生物检材中13种贝类毒素的检验方法

权利要求书

1.生物检材中13种贝类毒素的检验方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤A、生物检材的处理：生物检材经萃取处理后得到样品提取液；

步骤B、标准物质溶液的准备：以水为溶剂，用13种贝类毒素的标准物质分别配制13种贝类毒素的标准物质溶液；

步骤C、标准溶液的准备：用13种贝类毒素的标准物质溶液分别配制13种贝类毒素的标准溶液；

步骤D、混合标准工作溶液的准备：分别用13种贝类毒素的标准物质溶液配制混合标准工作溶液；

步骤E、质控样品的制备；

步骤F、分别吸取样品提取液、空白样品提取液、添加样品提取液、标准溶液和混合标准工作溶液，采用液相色谱-质谱仪进行检测，分析并计算检测结果；

所述13中贝类毒素分别为：C1、C2、GTX1、GTX2、GTX3、GTX4、GTX5、STX、NEO、dcSTX、dcNEO、dcGTX2和dcGTX3。

2.根据权利要求1所述的生物检材中13种贝类毒素的检验方法，其特征在于，在步骤A中，所述生物检材为血液或尿液；

所述生物检材的处理方法为：取血液或尿液的生物检材样品于离心管中，用乙酸溶液调节pH至2.0-4.0，离心后吸取上清液于容量瓶中；向含有沉淀物的离心管中再加入乙酸溶液，涡旋混合，再次离心，将两次上清液合并，用乙酸溶液稀释，得到样品提取液。

3.根据权利要求2所述的生物检材中13种贝类毒素的检验方法，其特征在于，在步骤A中，所述生物检材为血液或尿液；

所述生物检材的处理方法为：取血液或尿液的生物检材样品1.0mL于50mL离心管中，用1.0vt％乙酸溶液调节pH至2.0-4.0；4℃条件下7000r/min离心10min，然后吸取上清液于10mL容量瓶，向含有沉淀物的离心管中再加入3mL 1.0vt％乙酸溶液，涡旋混合，4℃条件下7000r/min再次离心10min，将两次上清液合并，用1.0vt％乙酸稀释至10.0mL，得到样品提取液。

4.根据权利要求1所述的生物检材中13种贝类毒素的检验方法，其特征在于，在步骤A中，所述生物检材为生物组织；

所述生物检材的处理方法为：取绞碎的生物组织于离心管中，加入乙酸溶液在冰水混合浴中进行组织匀浆，用乙酸溶液调节pH，涡旋混合，然后置于沸水浴中加热；水浴加热后取出离心管，再次涡旋混合，并冷却至室温，调节pH至2.0-4.0，离心后吸取上清液于容量瓶中；向含有沉淀物的离心管中加入乙酸溶液，涡旋混合，再次离心，将两次上清液合并，用乙酸溶液稀释，得到样品提取液。

5.根据权利要求4所述的生物检材中13种贝类毒素的检验方法，其特征在于，在步骤A中，所述生物检材为生物组织；

所述生物检材的处理方法为：称取绞碎的组织1.0g，于50mL离心管中，加入5mL1.0vt％乙酸溶液在冰水混合浴中进行组织匀浆，用0.1vt％乙酸溶液调节2＜pH＜4，涡旋混合，然后置于沸水浴中加热5min；水浴加热后取出离心管，再次涡旋混合，并冷却至室温，调节pH至2.0-4.0；4℃条件下7000r/min离心10min，然后吸取上清液于10mL容量瓶，向含有沉淀物的离心管中再加入3mL 1.0vt％乙酸溶液，涡旋混合，4℃条件下7000r/min再次离心10min，将两次上清液合并，用1.0vt％乙酸稀释至10.0mL，得到样品提取液。