[发明专利]一种使用Excel精确检测SOD酶活的方法

权利要求书

1.一种使用Excel精确检测SOD酶活的方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤一：配制A液：pH值8.2；

0.1mL三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲溶液（内含1mmol/L EDTA·2Na）；

称取1.2114 g Tris和37.2mgEDTA·2Na溶于62.4mL0.1moL盐酸溶液中,用蒸馏水定容至100mL；

步骤二：配制B液：4.5mmoL邻苯三酚盐酸溶液；

称取邻苯三酚(A.R)56.7mg溶于少量10mmol/L盐酸溶液,并定容至100mL；

步骤三：邻苯三酚自氧化速率测定在25℃时,于10mL比色管中依次加入A液2.35mL、蒸馏水2.00mL、B液0.15mL，加入B液立即混合并倾入比色皿中,分别测定在325nm波长条件下初始时和1min后吸光值,二者之差即邻苯三酚自氧化速率△A325(min-1)；

步骤四：SOD酶液抑制邻苯三酚自氧化速率测定，按步骤三加入一定量酶液使抑制邻苯三酚自氧化速率为△A325(min-1)的50%，此时的酶活定义为SOD酶活，计算公式为：

（公式1）

△A325-邻苯三酚自氧化数率；

△’A325-SOD样品抑制邻苯三酚的自氧化速率；

V-所加SOD样品的体积，单位mL；

D-SOD酶液的稀释倍数；

4.5-反应液总体积，单位mL；

步骤五：将加入SOD酶液之后每间隔1min的数据记录入Excel，分别为5组数据，即△'1,△'2, △'3, △'4,△'5。

2.根据权利要求1所述的一种使用Excel精确检测SOD酶活的方法，其特征在于：将步骤五中的5点的数值在Excel上模拟出对应曲线并计算偏差，当曲线线性拟合度在99%以上时，判断此时的邻苯三酚自氧化速率拟制曲线为直线。

3.根据权利要求2所述的一种使用Excel精确检测SOD酶活的方法，其特征在于：计算直线的斜率K'，当K'/K=50%时，将△'A325的吸光值代入公式1，得出SOD酶活。