[发明专利]一种磁珠-核酸适配体及其与微混合器的组合产品、制备方法和应用在审
申请号: | 202110906311.4 | 申请日: | 2021-08-09 |
公开(公告)号: | CN113584039A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 郑国旋;韩平畴;潘荣斌 | 申请(专利权)人: | 江西微润芯璟科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N5/09;G01N33/569;G01N33/574 |
代理公司: | 北京鹏帆慧博知识产权代理有限公司 11903 | 代理人: | 祝辽原 |
地址: | 330000 江西省南昌市青山*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 适配体 及其 混合器 组合 产品 制备 方法 应用 | ||
1.一种磁珠-核酸适配体,包括磁珠和核酸适配体;其特征在于,所述核酸适配体包括EpCAM蛋白适配体和CSV蛋白适配体;所述EpCAM蛋白适配体的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;所述CSV蛋白适配体的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的磁珠-核酸适配体,其特征在于,所述磁珠的直径为40~60微米。
3.权利要求1或2所述磁珠-核酸适配体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将所述核酸适配体和磁珠重悬于洗涤结合缓冲液中,得到重悬混合液;
(2)将所述重悬混合液旋转混合,得到所述磁珠-核酸适配体。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述洗涤结合缓冲液以水为溶剂,包括5~15mM的Tris-HCl,0.5~1.5mM的EDTA,0.5~1.5M的NaCl,0.02~0.1%v/v的Tween-20。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,在步骤(1)所述重悬之前,所述核酸适配体经过加热和冷却处理;所述加热的温度为85~95℃;所述加热的时间为5~15分钟;所述冷却的时间为10~20分钟,所述冷却后的核酸适配体温度为15~30℃;在步骤(1)所述重悬之前,所述磁珠用所述洗涤结合缓冲液洗涤1~5次。
6.一种磁珠-核酸适配体与微混合器的组合产品,其特征在于:包括权利要求1或权利要求2所述的磁珠-核酸适配体,还包括微流控微混合器。
7.根据权利要求6所述的组合产品,其特征在于,所述微混合器包括血液入口、磁珠溶液入口、若干个环形混合单元和出口;所述血液入口、磁珠溶液入口通过若干个环形混合单元和出口连接。
8.根据权利要求7所述的组合产品,其特征在于,所述环形混合单元的数量为2~10个;所述环形混合单元在所述微混合器中的排列模式为非对称上下颠倒排列。
9.权利要求1或2所述的磁珠-核酸适配体、权利要求6~8任意一项所述的组合产品在非疾病诊断和治疗目的的快速捕获循环肿瘤细胞中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述组合产品中的微流控微混合器的血液入口或磁珠溶液入口的工作流速为2~12ml/min。
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