[发明专利]用于治疗癌症的被遗传修饰的NK-92细胞和单克隆抗体

说明书

本发明涉及患有或怀疑患有癌症的受试者的治疗，其包括向受试者施用单克隆抗体和表达Fc受体的NK‑92。

本申请是申请日为2016年3月25日、申请号为2016800190874、发明名称为“用于治疗癌症的被遗传修饰的NK-92细胞和单克隆抗体”的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求2015年3月27日提交的美国临时申请NO.62/139,258的优先权权益，其通过引用并入本文。

背景技术

单克隆抗体(mAbs)的抗癌治疗已经显著改善癌症患者的临床结果，特别是当与化学疗法组合时。然而，患者经常最终复发。自然杀伤细胞也可以用作细胞毒性效应细胞用于基于细胞的免疫治疗。

NK-92是在患有非霍奇金淋巴瘤的受试者的血液中发现，且然后离体永生化的细胞溶解性癌细胞系。NK-92细胞来源于NK细胞，但缺乏正常NK细胞展示的主要抑制性受体，同时保留大部分活化受体。然而，NK-92细胞不攻击正常细胞，也不在人类中引起不可接受的免疫排斥反应。NK-92细胞系的表征在WO 1998/49268和美国专利申请公布No.2002-0068044中公开了。NK-92细胞也被评估为治疗某些癌症的潜在治疗剂。

尽管NK-92细胞保留了与NK细胞相关的几乎所有活化受体和细胞溶解途径，但它们在其细胞表面上不表达CD16。CD16是Fc受体，其识别并结合抗体的Fc部分以激活NK细胞用于抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)。由于没有CD16受体，NK-92细胞不能通过ADCC机制裂解靶细胞。

本发明通过向需要抗癌治疗的受试者同时或随后施用表达Fc受体的NK-92细胞，增强一些分子抗体的细胞毒性作用，提供了上述问题的解决方案。

发明内容

在一个方面，本发明包括向需要抗癌治疗的受试者共同施用对靶癌细胞具有细胞毒性作用的单克隆抗体和被工程化以表达Fc受体的NK-92细胞。这种组合协同NK细胞的抗癌作用与治疗性抗体的抗癌作用。

因此，在一个实施方式中，本发明提供了用于在有需要的受试者中治疗癌症的方法，其包括向所述受试者施用对靶癌细胞具有细胞毒性作用的单克隆抗体和表达FcR的NK-92细胞。在一些实施方式中，FcR是CD16。在本发明的一个方面，NK-92细胞被遗传修饰以表达编码与SEQ ID NO:1具有至少90％序列同一性的多肽的Fc受体(在第158位具有苯丙氨酸的FCγRIII-A或CD16(F-158)；或与SEQ ID NO:2具有至少90％序列同一性的多肽的Fc受体(在第158位具有缬氨酸的CD16(F158V)，更高亲和力形式)。在典型的实施方式中，CD16多肽在158位具有缬氨酸。

在另外的实施方式中，NK-92细胞被另外地修饰以表达细胞因子，例如IL-2。在一些实施方式中，细胞因子靶向内质网。在具体实施方式中，细胞因子是靶向内质网的白细胞介素-2或其变体。在一些实施方式中，NK-92细胞被修饰以表达具有SEQ ID NO:7的序列的多肽。

在其它实施方式中，NK-92细胞被进一步修饰以表达自杀基因。在一个方面，自杀基因是iCas9。

本发明的组合物可用于治疗癌症，包括但不限于癌症如多发性骨髓瘤，白血病，淋巴瘤，转移性乳腺癌或胃癌。

被施用于患者的单克隆抗体可以是裸单克隆抗体，缀合单克隆抗体或双特异性单克隆抗体。在一些实施方式中，单克隆抗体是阿仑单抗，利妥昔单抗，曲妥珠单抗，替伊莫单抗(ibritumomab)，吉妥珠单抗(gemtuzumab)，本妥昔单抗(brentuximab)，阿曲坦单抗(adotranstuzumab)，blinatunomab，daratumumab或埃罗妥珠单抗(elotuzumab)。