[发明专利]一种流感病毒NS1蛋白的表达质粒、重组蛋白和特异性单克隆抗体及应用

说明书

本发明提供了一种流感病毒NS1蛋白的表达质粒、重组蛋白和特异性单克隆抗体及应用，涉及抗体工程技术领域。本发明通过体外重组表达A型流感病毒的NS1蛋白，筛选出了对流感病毒感染的小鼠具有治疗效果的单克隆抗体。在本发明实施例中，所述单克隆抗体，对A型流感病毒感染的小鼠具有治疗效果，为预防和治疗流感病毒提供了一种策略，具有广阔的临床应用前景。

技术领域

本发明属于抗体工程技术领域，具体涉及一种流感病毒NS1蛋白的表达质粒、重组蛋白和特异性单克隆抗体及应用。

背景技术

流感病毒是一种能够造成人类和动物患流行性感冒的RNA病毒，属正黏病毒科，为分节段的单负链RNA病毒。流感病毒易发生抗原变异，抗原漂移与抗原转变是主要的抗原变异形式。按核蛋白核基质蛋白抗原性的不同，流感病毒分为A、B、C、D四型，A型流感病毒最易发生变异，已引起多次大流行。B型流感病毒对人类致病性也比较强，但是人们还没有发现B型流感病毒引起过世界性大流行；C型流感病毒只引起人类不明显的或轻微的上呼吸道感染，很少造成流行。流感病毒在健康人群的感染多为自限性，尚无特效药物。接种疫苗是预防流感病毒的最有效的方法，但由于流感病毒容易发生抗原漂移和抗原转换，导致每年流行株的变化、疫苗免疫力的差异，在大流行流感发生时，生产用毒株选择的滞后导致疫苗不能够快速上市，难以在病毒流行初期为人群提供有效的免疫保护。因此，开发针对流感病毒有效的预防和治疗药物依然任重道远。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种流感病毒NS1蛋白的表达质粒、重组蛋白和特异性单克隆抗体及应用，所述单克隆抗体对A型流感病毒具有治疗效果，为流感病毒的治疗提供一种参考。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种包含A型流感病毒NS1保守片段的重组质粒，所述NS1保守片段的编码基因包括SEQ ID NO.1所示的序列。

优选的，所述重组质粒的基础载体包括pET28a。

优选的，所述NS1保守片段的氨基酸序列包括SEQ ID NO.2所示的序列。

本发明还提供了一种表达A型流感病毒NS1保守片段的重组菌，所述重组菌的基因组包含上述重组质粒。

本发明还提供了一种与重组NS1蛋白发生特异性反应的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括5F11和3E5，所述5F11的重链可变区包括三个互补决定区，所述互补决定区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3~SEQ ID NO.5所示；所述5F11的轻链可变区包括三个互补决定区，所述互补决定区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.8~SEQ ID NO.10所示；

所述3E5的重链可变区包括三个互补决定区，所述互补决定区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.13~SEQ ID NO.15所示；所述3E5的轻链可变区包括三个互补决定区，所述互补决定区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.18~SEQ ID NO.20所示；

所述重组NS1蛋白由上述重组菌经IPTG诱导得到。

优选的，所述5F11的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述5F11的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。

优选的，编码所述5F11的重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，编码所述5F11的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。

优选的，所述3E5的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述3E5的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示。

优选的，编码所述3E5的重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示，编码所述3E5的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示。