[发明专利]一种乳品防伪溯源的组学分析方法

权利要求书

1.一种基于UHPLC-SWATH-MS/MS和Qemistree的乳品防伪溯源的脂质组学分析方法，包括以下步骤：

(1)提取乳品中的脂质，并以SWATH模式采集样品中化合物的UHPLC-SWATH数据；

(2)利用软件对步骤(1)得到的UHPLC-SWATH数据进行去卷积、色谱峰识别和色谱峰对齐，通过数据库比对鉴定化合物，并挑选出脂质，形成脂质列表；

(3)通过步骤(2)得到的脂质列表与步骤(1)得到的UHPLC-SWATH数据筛选特征离子对，并验证特征离子对的可用性，得到验证后的特征离子对列表；

(4)利用步骤(1)得到的UHPLC-SWATH数据，结合步骤(3)中验证后的特征离子对列表提取定量数据，并采用Qemistree的统计学分析方法进行分析，得到基于Qemistree的主坐标分析结果，即：乳品溯源的脂质组学分析结果。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述提取乳品中的脂质具体是：

将乳粉和水以1:10～1:20的质量比复溶；或，将液态乳按干重和水质量比1:10～1:20进行稀释，得到液态样品；

在50μL～100μL液态样品中加入氯仿和甲醇的混合溶液1～2mL，超声混匀后加入超纯水0.15～0.25mL，超声混匀；离心、取下层有机相，干燥、复溶，得到脂质样品；之后将不同的脂质样品取等体积混合，形成混合样品；其中氯仿和甲醇的混合溶液中氯仿和甲醇的体积比为2:1。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的以SWATH模式采集样品中化合物的UHPLC-SWATH数据，具体为：

采集单个或混合样品中的数据，形成UHPLC-SWATH数据；之后在质谱自带的数据处理软件中打开UHPLC-SWATH数据，提取UHPLC-SWATH-MS1图谱观察单一化合物的峰宽，按照每个峰采集10到15个点的原则确定数据采集的Cycle time；再根据公式Cycle time＝MS1accumulation time+SWATH窗口数*MS2 accumulation time+模式切换时间，依次确定SWATH采集参数；其中MS1 accumulation time大于150ms，MS2 accumulation time大于45ms。

4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述色谱峰的强度阈值为1000～3000amplitude，Mass slice width为0.05或0.1Da，Sigma window value为0.4～0.6，二级质谱背景噪音阈值为10～30amplitude，同位素离子范围为0.5Da。

5.根据权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中筛选特征离子对是借助R语言包SWATHtoMRM筛选特征离子对，根据仪器状态设置参数，优选为peakwidth＝c(8，30)，sn＝20，minfrac＝1，minfrac.vote＝0.5，nSlaves＝2，ppm.pd＝15，cutoff＝0.8，ppm.ms2.mtp＝15，int.filter.ms1.field＝'maxo'，int.filter.ms1＝1000，int.filter.ms2＝200。

6.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中验证特征离子对的可用性具体是将特征离子对列表输入质谱自带的数据处理软件中，从SWATH模式采集得到的UHPLC-SWATH数据中提取含有特征子离子信息的SWATH-MS/MS数据，观察在母离子对应保留时间是否有峰，剔除假阳性。