[发明专利]核苷酸序列的应用

权利要求书

1.一组核苷酸序列在培育番茄自主异花授粉自主单性结实系中的应用，其特征在于，所述核苷酸序列包括：如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列；

其中，所述番茄自主异花授粉自主单性结实系通过以下方法培育得到，包括：

从番茄基因组上选取多个靶位点，并构建用于敲除靶位点的载体，所述靶位点的核苷酸序列为如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列；

将构建所得的载体导入番茄外植体进行组织培养获得转化苗；

从所述番茄转化苗中筛选出阳性株系，经鉴定后，得到所述番茄自主异花授粉自主单性结实系。

2.根据权利要求1所述的一组核苷酸序列在培育番茄自主异花授粉自主单性结实系中的应用，其特征在于，所述多个靶位点选自番茄基因组中的AGL6基因和MS10基因或者F3H基因和GST基因。

3.根据权利要求1所述的一组核苷酸序列在培育番茄自主异花授粉自主单性结实系中的应用，其特征在于，如SEQ ID NO.6所示的靶位点纯合敲除的株系是自主异花授粉自主单性结实系，如SEQ ID NO.6所示的靶位点杂合敲除的株系是自主异花授粉自主单性结实系的恢复系。

4.根据权利要求3所述的一组核苷酸序列在培育番茄自主异花授粉自主单性结实系中的应用，其特征在于，所述番茄自主异花授粉自主单性结实系的繁育方法，包括以下步骤：

将所述番茄自主异花授粉自主单性结实系与其恢复系进行杂交，获得子代植株，根据所述子代植株的茎秆颜色进行筛选。

5.根据权利要求4所述的一组核苷酸序列在培育番茄自主异花授粉自主单性结实系中的应用，其特征在于，所述子代植株的茎秆颜色为绿色时，其为番茄自主异花授粉自主单性结实系，所述子代植株的茎秆颜色为紫色时，其为番茄自主异花授粉自主单性结实系的恢复系。

6.一组核苷酸序列在培育番茄自主单性结实系中的应用，其特征在于，所述核苷酸序列包括：如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2以及SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；

其中，所述番茄自主单性结实系通过以下方法培育得到，包括：

从番茄基因组上选取多个靶位点，并构建用于敲除靶位点的载体，其中，所述靶位点的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2以及SEQ ID NO.3所示；

将构建所得的载体导入番茄外植体进行组织培养获得转化苗；

从所述番茄转化苗中筛选出阳性株系，经鉴定后，得到所述番茄自主单性结实系。

7.根据权利要求6所述的一组核苷酸序列在培育番茄自主单性结实系中的应用，其特征在于，所述多个靶位点选自番茄基因组上的AGL6基因。

8.根据权利要求1或6所述的应用，其特征在于，敲除所用方式为CRISPR/Cas9系统。

9.根据权利要求1或6所述的应用，其特征在于，将构建所得的载体导入番茄受体时，所用的导入方法为农杆菌侵染法。