[发明专利]一种降解污水中季铵化合物的固定化菌剂的制备方法

说明书

本发明属于环境生物治理技术领域，特别涉及一种降解污水中季铵化合物的固定化菌剂的制备方法。本发明将恶臭假单胞菌、嗜水气单胞菌和无色杆菌属细菌组成的复合菌群包被于海藻酸钙微球内，制得所述降解污水中季铵化合物的固定化菌剂。本发明原料易得，制备工艺稳定，制得的降解污水中季铵化合物的固定化菌剂可有效降解污水中的季铵化合物，适合广泛推广应用。

技术领域

本发明属于环境生物治理技术领域，特别涉及一种降解污水中季铵化合物的固定化菌剂的制备方法。

背景技术

人类日常生活或进行生产时会产生大量污水，污水主要分为生活污水、工业废水和养殖污水。季铵化合物作为一种阳离子表面活性剂，广泛应用于化工、制药、消毒等领域产品的生产，因而季铵化合物常见于生活污水和工业废水中。由于季铵化合物具有一定的毒性，含有季铵化合物的污水不经处理直接排放会对环境乃至人体造成危害。

目前，含有季铵化合物的污水一般采用活性污泥法进行处理，活性污泥中的微生物可降解污水中的季铵化合物。但由于季铵化合物对活性污泥中微生物的生长代谢有显著抑制作用，因而活性污泥中微生物降解季铵化合物的效率不高。此外，季铵化合物与污泥中杂质的结合度高，这就限制了微生物对季铵化合物的摄取，进一步降低了季铵化合物的降解效率。

发明内容

本发明为了弥补现有技术中活性污泥法降解污水中季铵化合物效率不高的问题，提供了一种降解污水中季铵化合物的固定化菌剂的制备方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种降解污水中季铵化合物的固定化菌剂的制备方法，包括如下步骤：（1）将0.10-0.14份恶臭假单胞菌、0.08-0.12份嗜水气单胞菌和0.06-0.08份无色杆菌属细菌组成的复合菌群按按质量体积比1g:40mL -1g:80mL溶于无菌去离子水中，制得菌液；（2）用去离子水配制质量比为4%-6%的海藻酸钠溶液，海藻酸钠溶液灭菌后与步骤（1）制得的菌液按体积比2:1混合均匀，得到微球原液；（3）将步骤（2）得到的微球原液滴入4℃-8℃的含0.3M-0.5M CaCl₂ 、24mM-26mM Tris-HCl、48mM-52mM NaCl的无菌凝固液中，制得直径2mm-3mm的微球，随后微球在无菌凝固液中持续固化1.5h-2h；（4）步骤（3）得到的微球用无菌生理盐水洗涤,洗涤后的微球保存在未使用过的无菌生理盐水中。

本发明将恶臭假单胞菌、嗜水气单胞菌和无色杆菌属细菌组成的复合菌群包被于海藻酸钙微球中用于治理含季铵化合物的污水。海藻酸钙微球可有限地吸附季铵化合物，使上述复合菌群能以较高效率降解季铵化合物；同时又不至于因海藻酸钙微球内的季铵化合物浓度过高，而影响复合菌群的生长代谢。

优选的，步骤（1）中，复合菌群由0.12份恶臭假单胞菌、0.10份嗜水气单胞菌和0.07份无色杆菌属细菌组成。

优选的，步骤（1）中，复合菌群按质量体积比1g:50mL溶于无菌去离子水中。

优选的，步骤（3）中，无菌凝固液含0.4M CaCl₂ 、25mM Tris-HCl、50mM NaCl。

优选的，步骤（4）中，微球的洗涤次数为3-4次。

本发明中，所述海藻酸钠与CaCl₂在制备体系中反应得到海藻酸钙微球。海藻酸钙具有良好的吸水性与生物相容性，同时还可吸附某些有机物。

所述恶臭假单胞菌属于假单胞菌属，为革兰阴性菌，运动较活泼，专性需氧，最适生长温度25℃-30℃，菌落与铜绿假单胞菌相似，但只产生荧光素（青脓素），不产生绿脓素，其陈旧培养物有腥臭味。

所述嗜水气单胞菌属于弧菌科气单胞菌属，为革兰氏阴性短杆菌，极端单鞭毛，没有芽胞和荚膜。在普通琼脂平板培养基上培养形成的菌落为圆形、边缘光滑、中央凸起、肉色、灰白色或略带淡桃红色有光泽，发育良好。