[发明专利]一种抑制组培植物内生菌污染的中草药预煮液及应用方法

说明书

本发明涉及植物组培的技术领域，公开了一种抑制组培植物内生菌污染的中草药预煮液及应用方法，中草药预煮液包含有夏枯草预煮液，本发明在组培植物的培养基中开创性的使用了夏枯草预煮液，夏枯草预煮液能够有效的抑制组培植物内生菌的污染。

技术领域

本发明涉及植物组培的技术领域，特别是一种抑制组培植物内生菌污染的中草药预煮液及应用方法。

背景技术

植物内生菌是指生活于健康植物组织和器官内部的真菌、细菌或放线菌，其与宿主植物形成相互促进或抑制的关系，进而影响着植物生长发育。在植物组织培养中，大部分内生菌污染均可导致植株枯萎死亡，降低成苗率。有研究表明，培养基中添加适宜浓度的抑菌剂可减少植物组织培养中内生菌的生长，降低污染系数，提高组培效率。金线莲组织培养中，随着金线莲继代次数的增加，黄色内生菌污染严重，影响金线莲组培生长的正常运行。

目前常用的内生菌抑菌剂主要是氯霉素、山梨酸钾、硫酸链霉素、氨苄青霉素、苯甲酸钠等，针对金线莲内生菌的抑制作用比较有限，有的甚至对金线莲的内生菌起到增强作用，另外，现有的内生菌抑菌剂均为化学试剂对人体有较大的危害且容易污染环境。

夏枯草(Prunella vulgaris L.)为唇形科多年生草本植物，高1-40厘米，夏枯草有降低血压、扩张血管的作用，其所含黄酮类成分芦丁、苯丙素类成分迷迭香酸具有抗炎、抗氧化、抗病毒的功效。夏枯草抗菌谱广，水浸出液对大肠杆菌、结核杆菌、肺炎球菌、痢疾杆菌、葡萄球菌等均有抑制生长作用，目前，夏枯草的抑菌作用主要体现于对动物的病菌的抑制，现在还没有相关的夏枯草应用在抑制植物内生菌污染的研究报道。

发明内容

为此，需要提供了一种抑制组培植物内生菌污染的中草药预煮液及其应用方法，拓展了夏枯草的抑制植物内生菌，特别是抑制金线莲内生菌的应用。

为实现上述目的，本发明提供了一种抑制组培植物内生菌污染的中草药预煮液，包含有夏枯草预煮液。

进一步，包括MS+0.1-0.3mg/L IBA+5％-15％香蕉+0.5-1.0％琼脂粉+0.1％-0.5％蔗糖+0.1％-0.5％活性炭+100g/L-200g/L夏枯草预煮液。

进一步，包括MS+0.1mg/L IBA+10％香蕉+0.7％琼脂粉+0.3％蔗糖+0.3％活性炭+100g/L-200g/L夏枯草预煮液。

进一步，所述夏枯草预煮液的制备过程如下：在夏枯草中加入15-25倍的水，加热煮沸6-8h，过滤、冷却得到夏枯草预煮液。

上述抑制组培植物内生菌污染的抑菌培养基的应用方法，使用过程如下：配置上述的抑菌培养基，之后将组培植物接种到抑菌培养基进行培养。

进一步，所述组培植物为金线莲。

进一步，金线莲的培养条件为：温度25-28℃，湿度控制在35％以内，光强为500～1500lx，每天光照时间为10小时。

进一步，所述金线莲接种时选用的是金线莲的带芽茎段。

进一步，所述金线莲的带芽茎段的长度为1-2cm。

上述技术方案具有以下有益效果：

本发明中，中草药预煮液作为组培植物的抑菌培养基，开创性的将夏枯草的预煮液应用到组培植物的培养基时，夏枯草的预煮液具有一定的抑菌活性，能够通过影响特异类别的内生菌活力，抑制内生菌繁殖，，从而有效的抑制组培植物内生菌，特别是金线莲内生菌的污染，并且随着夏枯草预煮液在培养基中用量的增加，抑菌效果可以达到100％。

附图说明

图1为具体实施方式所述试验组1-6的培养结果图。

图2为具体实施方式所述试验组7-12的培养结果图。