[发明专利]一种毛囊间充质干细胞的培养基及其制备方法

说明书

本发明公开了一种毛囊间充质干细胞的培养基及其制备方法，该毛囊间充质干细胞的培养基以DMEM/F‑12为基础培养基，还包括胎牛血清、碱性成纤维细胞生长因子、人参茎叶皂苷、表皮生长因子、胰岛素、青霉素、链霉素；该制备方法包括：步骤一，制备基础培养基；步骤二，向基础培养基中加入胎牛血清、碱性成纤维细胞生长因子母液、人参茎叶皂苷母液、表皮生长因子母液、胰岛素、青霉素、链霉素，搅拌至完全溶解；步骤三，调节PH至7.2，过膜除菌。本发明所能够改善毛囊间充质干细胞的贴壁性和细胞干性，而且对细胞的增殖具有很好的促进作用；此外，本发明所提供的毛囊间充质干细胞培养基的制备方法简单，有利于降低制备成本。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域，具体涉及一种毛囊间充质干细胞的培养基及其制备方法。

背景技术

干细胞的发现及其移植技术的建立，为传统医学上认为是“不治之症”的疾病的治疗带来了新的生机和希望。干细胞在医学美容及抗衰等方面也发挥着巨大的作用。多种来源间充质干细胞是目前应用最为广泛的、最安全的干细胞。来源于毛囊的间充质干细胞被认为目前较为理想的干细胞，具有如下优势：1)安全性高，无致瘤性，每个人都可以保存自己的毛囊间充质干细胞，保存后需要时仍用于自体，无疾病传播风险，是一个自身的健康和生命的储备；2)来源丰富，机体没有任何一个组织比毛囊丰富，人的头皮存在有约百万个毛囊，身体其他部位也存在较多毛囊；3)无年龄限制，上至八十高龄的老人，下至胎儿，在任何年龄段都可以获得属于自己毛囊间充质干细胞；4)取材无创，且可重复取材，拔取数十根毛发即可获得，对患者来说无任何痛苦；5)增殖和分化能力强，在体外短期内就可获得大量毛囊间充质干细胞，且仍能保持间充质干细胞的特性，可分化为骨、软骨、神经、脂肪、肌肉及等多种功能细胞，并具有免疫调节功能。

由于毛囊间充质干细胞具有高增殖能力，位于体表易于获取，无再创伤性，并有向表皮以及附属气管分化的特性，使其成为表皮重建的理想细胞来源，因此毛囊间充质干细胞作为新的种子细胞日益受到重视。但是目前使用的用于培养毛囊间充质干细胞的培养基存在细胞贴壁性差，细胞增殖速度不够理想的问题。

发明内容

本发明为解决现有技术的不足，提供了一种毛囊间充质干细胞的培养基及其制备方法。

为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：

一种毛囊间充质干细胞的培养基，以DMEM/F-12为基础培养基，还包括体积百分含量9～11％胎牛血清、7～8μg/L碱性成纤维细胞生长因子、11～14μg/mL人参茎叶皂苷、19～21μg/L表皮生长因子、3～4mg/L胰岛素、80～90mg/L青霉素、95～105mg/L链霉素。

进一步的，以DMEM/F-12为基础培养基，还包括体积百分含量9％胎牛血清、7μg/L碱性成纤维细胞生长因子、14μg/mL人参茎叶皂苷、19μg/L表皮生长因子、3mg/L胰岛素、80mg/L青霉素、95mg/L链霉素。

进一步的，以DMEM/F-12为基础培养基，还包括体积百分含量10％胎牛血清、7.5μg/L碱性成纤维细胞生长因子、12.5μg/mL人参茎叶皂苷、20μg/L表皮生长因子、3.5mg/L胰岛素、85mg/L青霉素、100mg/L链霉素。

进一步的，以DMEM/F-12为基础培养基，还包括体积百分含量11％胎牛血清、8μg/L碱性成纤维细胞生长因子、11μg/mL人参茎叶皂苷、21μg/L表皮生长因子、4mg/L胰岛素、90mg/L青霉素、105mg/L链霉素。

本发明还提供了一种制备上述毛囊间充质干细胞的培养基的方法，包括以下步骤：

步骤一，取DMEM/F-12的干粉溶解在高压灭菌的双蒸水中，用磁力搅拌器搅拌至完全溶解制得基础培养基；

步骤二，向由步骤一制得的基础培养基中加入一定量的胎牛血清、碱性成纤维细胞生长因子母液、人参茎叶皂苷母液、表皮生长因子母液、胰岛素、青霉素、链霉素，搅拌至完全溶解；