[发明专利]双胞菇多糖在提高克氏原螯虾免疫及抗嗜水气单胞菌感染中的应用

说明书

本发明公开了双胞菇多糖在提高克氏原螯虾免疫及抗嗜水气单胞菌感染中的应用，试验饲料中双胞菇多糖添加量分别为0.5%、1.0%、1.5%、2.0%和3.0%，以基础饲料为对照进行为期28天的试验，结果显示，双胞菇多糖能够促进克氏原螯虾的生长，对克氏原螯虾非特异性免疫指标、免疫相关基因的表达起到一定的促进作用，提高嗜水气单胞菌感染后的抵抗力，从而证实双胞菇多糖可作为克氏原螯虾的免疫增强剂，并可用于制备预防或治疗嗜水气单胞菌感染的药物。

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及双胞菇多糖在提高克氏原螯虾免疫及抗嗜水气单胞菌感染中的应用。

背景技术

克氏原螯虾(Procambarus clarkii)俗称小龙虾，隶属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、蝲蛄科(螯虾科)、原螯虾属，是甲壳纲的主要代表物种。作为水产经济动物之一，近年来养殖集约化程度的提高，导致病害发生频率和种类渐增。嗜水气单胞菌对克氏原螯虾的危害越发严重，明显降低其成活率。为避免传统治疗中抗生素耐药和化学药品残留问题，寻找药食同源，副作用小的免疫增强剂显得尤为重要。

双胞蘑菇(Agaricus bisporus)简称白菇，属草腐生，中低温型，因具两个担子得名，是一种含有高含量多酚、维生素、矿物质和多糖的保健品。双胞菇多糖作为双胞蘑菇的主要提取物，具有增强机体免疫，保肝，抗氧化，抑制癌细胞抗肿瘤和提神抗疲劳等功效。双胞菇多糖的研究主要集中于小鼠、细胞和食品上，关于双胞菇多糖对水产动物克氏原螯虾的影响未见报道。因此，本发明旨在探究双胞菇多糖对克氏原螯虾非特异性免疫的影响，填补双胞菇多糖在水产养殖中的空白。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供双胞菇多糖在提高克氏原螯虾免疫及抗嗜水气单胞菌感染中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

双胞菇多糖在提高克氏原螯虾免疫方面的应用：在本发明的具体实施例中，试验饲料中双胞菇多糖添加量分别为0.5％、1.0％、1.5％、2.0％和3.0％，以基础饲料为对照进行为期28天的试验，探究双胞菇多糖对其肝胰腺和血清非特异性免疫指标、免疫相关基因表达的影响，结果显示，0.5％～2.0％双胞菇多糖的添加对其相对生长率均有促进作用，肝胰腺和血清中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、总超氧化物歧化酶和溶菌酶相比于对照组都增加，1.5％和2.0％添加组效果显著；同时，1.5％的添加量中mtMNSOD(线粒体锰超氧化物歧化酶)、ctsb(组织蛋白酶B)、alf(抗脂多糖因子)、Lec(凝集素)和gpxs(谷胱甘肽过氧化物酶)在肝胰腺和鳃中表达均上调，且1.5％添加组相比对照组差异显著(P0.05)，HSP70(热休克蛋白70)表达量在肝胰腺中上调，在鳃中下调。由此可见，饲料中添加双胞菇多糖对克氏原螯虾非特异性免疫指标、免疫相关基因的表达起到一定的促进作用，双胞菇多糖可作为克氏原螯虾的免疫增强剂。

双胞菇多糖在抗嗜水气单胞菌感染中的应用：在本发明的具体实施例中，为验证投喂双胞菇多糖后对克氏原螯虾感染嗜水气单胞菌后的保护效果，用嗜水气单胞菌对克氏原螯虾进行攻毒试验，统计6天的累计死亡率，结果表明对照组的累计死亡率为90.00％，双胞蘑菇多糖添加量为1.5％时累计死亡率降低为67.19％，双胞菇多糖对克氏原螯虾有较强的保护力，这与基因表达结果一致，究其原因可能是双胞菇多糖通过刺激小龙虾的非特异性系统，机体产生免疫应答，随后增加其对嗜水气单胞菌感染后的抵抗力。

附图说明

图1为双胞蘑菇多糖对克氏原螯虾肝胰腺中免疫相关基因表达的影响。

图2为双胞蘑菇多糖对克氏原螯虾鳃免疫相关因子表达的影响。

图3为双胞蘑菇多糖对克氏原螯虾感染嗜水气单胞菌后死亡率的影响。