[发明专利]一种合作猪源粘膜乳杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一种合作猪源粘膜乳杆菌及其应用。该菌株命名为粘膜乳杆菌LM410，保藏号为CGMCC No.22828。该菌株分离自健康合作猪粪便，具有良好的产酸、耐酸和耐胆盐能力以及拮抗病原菌能力。本发明提供的粘膜乳杆菌LM410能够抑制C型产气荚膜梭菌生长并对C型产气荚膜梭菌致猪肠上皮细胞损伤具有明显保护作用，在畜禽细菌感染性肠道疾病防治方面具有广阔的发展前景和应用价值。

技术领域

本发明涉及一种合作猪源粘膜乳杆菌及其应用，属于微生物技术领域。

背景技术

仔猪腹泻一直是困扰养猪生产的主要疾病之一，严重影响养猪业的经济效益。据报道我国仔猪死亡率为15%～20%，其中由腹泻引起的仔猪死亡数约占死亡总数的40%，每年给养猪业带来的直接经济损失达数百亿元。C型产气荚膜梭菌，又称C型魏氏梭菌，是引起仔猪腹泻的主要病原之一；其感染主要发生于2周龄以内的仔猪，且具有发病急、病程短的特点，发病仔猪死亡率达70%以上，严重影响着养猪业的健康发展。据报道，产气荚膜梭菌感染性腹泻在世界各养猪国家均有发生；经调查2015年我国广东、江西、湖北和云南的33个规模化猪场，产气荚膜梭菌在仔猪哺乳阶段的感染率高达80%。

尽管目前通过加强饲养管理、注射疫苗和使用抗生素药物防治等措施在一定程度上减少和控制了该腹泻疾病的发生，但抗生素的长期使用，出现了病原菌耐药性增强和抗生素残留等问题。与此同时，预防该病原感染的类毒素疫苗的效果易受其类毒素抗原成分的影响。这些问题使得对仔猪C型产气荚膜梭菌感染性腹泻防治的难度不断加大，且无抗养殖和绿色健康养殖也要求尽可能减少甚至禁止抗生素的使用。因此，寻求一种替代抗生素的策略是防治仔猪C型产气荚膜梭菌性腹泻的迫切需求。

粘膜乳杆菌（Lactobacillus mucosae）是存在于动物肠道中的乳酸杆菌类益生菌之一。近年来，有研究发现，粘膜乳杆菌在细胞黏附、代谢碳水化合物产酸和拮抗致病菌等方面具有重要作用，其可通过紧密连接蛋白去磷酸化和肌动蛋白调节等影响肠屏障的完整性和功能。还有研究发现，粘膜乳杆菌在粘附于肠上皮组织形成生物被膜的同时产生抗菌素，具有抑制病原菌的定植并调节肠道免疫系统的益生作用。此外，Lactobacillus mucosaeNK41与长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）协同作用，通过抑制核因子κB（Nuclear factor kappa-B，NF-κB）蛋白活化、肿瘤坏死因子-α（Tumor NecrosisFactor-α，TNF-α）表达以及细菌脂多糖的产生来减轻小鼠的结肠炎症状。说明开发利用粘膜乳杆菌作为防治畜禽细菌感染性肠道疾病的抗生素替代策略，具有广阔的发展前景和应用价值。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种合作猪源粘膜乳杆菌，该粘膜乳杆菌具有良好的产酸、耐酸和耐胆盐能力以及拮抗C型产气荚膜梭菌生长的能力。

本发明的第二个目的是提供上述粘膜乳杆菌在防治C型产气荚膜梭菌感染致猪肠上皮细胞IPEC-J2损伤中的应用，在畜禽细菌感染性肠道疾病防治方面具有广阔的发展前景和应用价值。

为了解决上述问题，本发明首先提供了一种合作猪源粘膜乳杆菌，该粘膜乳杆菌是2021年7月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）的粘膜乳杆菌Lactobacillus mucosae，保藏编号为CGMCC No.22828。保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

所述粘膜乳杆菌Lactobacillus mucosae是从健康的合作猪粪便样品中分离纯化得到的。

所述粘膜乳杆菌Lactobacillus mucosae的16S rDNA序列为GenBank No.MZ047317。