[发明专利]垫状卷柏总黄酮提取制备及HPLC指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种中药总黄酮提取制备方法，其特征在于：中药用70％甲酸进行热回流提取，提取液滤过，过新型材料JHE8水合镁铝硅酸盐色谱柱脱色，再用X-5大孔吸附树脂吸附，用水洗脱，再用70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收溶剂，浓缩干燥，即得总黄酮提取物。

2.一种卷柏或垫状卷柏总黄酮提取制备方法，其特征在于：卷柏或垫状卷柏用70％甲酸进行热回流提取，提取液滤过，过新型材料JHE8水合镁铝硅酸盐色谱柱脱色，再用X-5大孔吸附树脂吸附，用水洗脱，再用70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收溶剂，浓缩干燥，即得卷柏或垫状卷柏总黄酮提取物。

3.根据权利要求2所述一种卷柏或垫状卷柏总黄酮提取制备方法，其特征在于：总黄酮提取物中同时含有穗花杉双黄酮等11个特征成分，具体检测条件如下：采用高效液相色谱法进行测定，色谱条件为：在0～23分钟内，流动相乙腈-0.2％甲酸溶液的体积比由6:94梯度增加至8:92，在23～60分钟内，流动相乙腈-0.2％甲酸溶液的体积比由8:92梯度增加至50:50，在60～65分钟内，流动相乙腈-0.2％甲酸溶液的体积比由50:50梯度减少至6:94，在65～75分钟内，流动相乙腈-0.2％甲酸溶液的体积比保持6:94，柱温为30℃；流速为每分钟1.0ml；检测波长为270nm；所述指纹图谱中有11个共有峰，编号依次为1～11：共有峰的峰号(相对保留时间)为：1(0.106)，2(0.199)，3(0.261)，4(0.283)，5(0.388)，6(0.488)，7(0.530)，8(0.587)，9(0.622)，10(0.978)，11(1.000)；峰11为穗花杉双黄酮。

4.根据权利要求2所述一种卷柏或垫状卷柏总黄酮提取制备方法，其特征在于：总黄酮提取物中总黄酮含量大于60％。

5.垫状卷柏HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于可以同时检测11个特征成分，具体按如下步骤检测：

(1)称取垫状卷柏药材1g，加70％甲酸50ml，加热回流提取60分钟，提取液用0.22μm～0.45μm的微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；称取穗花杉双黄酮对照品适量，加甲醇溶解，作为对照品溶液；

(2)采用高效液相色谱法进行测定，色谱条件为：在0～23分钟内，流动相乙腈-0.2％甲酸溶液的体积比由6:94梯度增加至8:92，在23～60分钟内，流动相乙腈-0.2％甲酸溶液的体积比由8:92梯度增加至50:50，在60～65分钟内，流动相乙腈-0.2％甲酸溶液的体积比由50:50梯度减少至6:94，在65～75分钟内，流动相乙腈-0.2％甲酸溶液的体积比保持6:94，柱温为30℃；流速为每分钟1.0ml；检测波长为270nm；

(3)所述指纹图谱中有11个共有峰，编号依次为1～11：共有峰的峰号(相对保留时间)为：1(0.106)，2(0.199)，3(0.261)，4(0.283)，5(0.388)，6(0.488)，7(0.530)，8(0.587)，9(0.622)，10(0.978)，11(1.000)；峰11为穗花杉双黄酮。

6.垫状卷柏HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于供试品溶液的制备方法为：垫状卷柏用70％甲酸进行热回流提取，提取液滤过，过新型材料JHE8水合镁铝硅酸盐色谱柱脱色，微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。

7.垫状卷柏HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于供试品溶液的制备方法为：垫状卷柏用70％甲酸进行热回流提取，提取液滤过，过新型材料JHE8水合镁铝硅酸盐色谱柱脱色，再用X-5大孔吸附树脂富集，微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。