[发明专利]合成子的形成在审
申请号: | 202110929228.9 | 申请日: | 2015-08-27 |
公开(公告)号: | CN113584015A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | P-C·赫塞;L·孙;T·C·小埃文斯;T·B·戴维斯;A·加德纳 | 申请(专利权)人: | 新英格兰生物实验室公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/64;C12N15/66;C12N9/22;C12N9/12;C07K19/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 丁秀云 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 合成 形成 | ||
1.一种用于组装合成子的组合物,其包括:
(a)5’-3’核酸外切酶;
(b)链置换聚合酶;
(c)任选地,单链DNA结合蛋白质;和
(d)非天然存在的缓冲剂,
其中所述组合物不包括拥挤剂和/或非链置换聚合酶。
2.根据权利要求1所述的组合物,其还包括连接酶和/或单链结合结构域。
3.根据权利要求1或2中任一项所述的组合物,其还包括一组至少两种多核苷酸。
4.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中所述链置换聚合酶为非天然存在。
5.根据权利要求4所述的组合物,其中所述链置换聚合酶为突变体或融合蛋白。
6.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中所述链置换聚合酶对热稳定。
7.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中所述链置换聚合酶为B族聚合酶,并且所述组合物不包括非链置换聚合酶。
8.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中不包括9°N、Phusion、Vent或PfuDNA聚合酶。
9.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中所述链置换聚合酶为融合蛋白,其中聚合酶部分的氨基酸序列与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:102、或SEQ ID NO:33至SEQ IDNO:55中任意者的同一性为至少90%。
10.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中所述融合蛋白的氨基酸序列与SEQID NO:1和SEQ ID NO:2的同一性为至少90%。
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