[发明专利]一种小鼠肉瘤放疗抵抗细胞株及其应用

说明书

本发明提供了一种小鼠肉瘤放疗抵抗细胞株S180‑R，保藏于中国微生物菌种保藏管理中心CGMCC，保藏号CGMCC No.21412；它是由小鼠肉瘤细胞株S180经多次X射线照射和培养后获得的放疗抵抗细胞株，放射抵抗性强，在小鼠肉瘤放疗抵抗机制的细胞模型中具有良好应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种小鼠肉瘤放疗抵抗细胞株及其应用。

背景技术

放疗是治疗恶性肿瘤的主要手段之一，是肿瘤综合治疗中不可或缺的关键组成部分。临床上，有超过70％的肿瘤患者在病程中需接受放疗。目前尽管放疗技术取得了巨大进步,放疗抵抗仍是放射治疗的主要障碍，最终可导致肿瘤复发、转移。找出恶性肿瘤对放疗抵抗的原因，从而增加肿瘤对放疗的敏感性是恶性肿瘤治疗领域一个急需解决的问题。

然而，放疗抵抗是一个复杂的生物学过程，与DNA损伤反应异常、细胞凋亡、自噬、基因突变、细胞周期检查点、信号通路失控等多种因素的共同作用有关。放疗抵抗细胞模型的应用可以为逆转放疗抵抗的研究奠定基础。由于在特定肿瘤类型中采用不同放射敏感性的细胞株无法排除不同细胞株的遗传背景差异所带来的影响，体外通过X射线对细胞反复照射筛选获得具有放疗耐受性的细胞株，并与亲本细胞进行对照研究，是在体外研究放疗抵抗机制的重要方法。

专利申请CN110878284A和CN107779438B分别公开了对人肺癌细胞株A549和PC9的放疗抵抗细胞系的构建方法；专利申请CN109735495A和CN104017799A分别公开了人鼻咽癌细胞株CNE-2的放疗抵抗细胞系的构建方法；专利申请CN106367391A公开了一种人直肠癌细胞SW480放疗抵抗细胞系的构建方法。上述现有技术均是对亲本细胞进行不同方法模式的X射线照射，成功构建了相应的放疗抵抗细胞系，得到的放疗抵抗细胞系与各自的亲本细胞相比，放疗抵抗的效果随构建方法的不同存在差异。

目前的现有技术还未见对小鼠肉瘤细胞系的放疗抵抗细胞株及其构建方法的报道。为进一步研究肉瘤放疗抵抗的分子机制、筛选放疗抵抗靶点、提高放疗敏感性提供基础，亟需研究具有优异放疗抵抗能力的小鼠肉瘤细胞株。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有优异放疗抵抗特性的小鼠肉瘤放疗抵抗细胞株，并提供该细胞株的构建方法和应用。

本发明提供了一种小鼠肉瘤放疗抵抗细胞株，它是保藏于中国微生物菌种保藏管理中心CGMCC，保藏号CGMCC No.21412的小鼠肉瘤放疗抵抗细胞株S180-R。

生物材料保藏：

本发明的小鼠肉瘤放疗抵抗细胞株S180-R已于2020年12月11日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC，地址：中国，北京，中国科学院微生物研究所)，保藏中心登记入册编号为：CGMCC No.21412。

进一步地，它是小鼠肉瘤细胞株S180经X射线照射后仍存活的细胞和/或其子代细胞。

更进一步地，上述X射线照射是三轮X射线照射，其中，每轮X射线照射的方法是以2Gy/次的剂量照射15次。

更进一步地，上述放疗抵抗细胞株由如下方法步骤获得：

(1)取小鼠肉瘤细胞S180以2Gy/次的剂量照射15次，得到存活的细胞；

(2)重复步骤(1)三次后，即得小鼠肉瘤放疗抵抗细胞株S180-R。

进一步地，步骤(1)所述小鼠肉瘤细胞株S180为对数生长期的小鼠肉瘤细胞株S180。

进一步地，步骤(1)还包括对存活的细胞进行消化、传代、培养的步骤。

本发明还提供了上述放疗抵抗细胞株在小鼠肉瘤放疗抵抗细胞模型中的应用。