[发明专利]一种检测粘度的大斯托克位移荧光探针及其制备和应用

说明书

本申请公开一种检测粘度的大斯托克位移荧光探针及其制备和应用，探针分子式为C₂₆H₂₄N₂O，结构式如式(I)所示：将化合物(2)和化合物(3)混合，加入乙腈及哌啶，在氮气保护下将混合物加热得反应液；将反应液旋干并分离纯化，制备得到所述的大斯托克斯位移荧光探针；本申请的荧光探针斯托克斯位移大于180nm，可用于制备粘度检测产品和荧光成像产品，还可用于定量检测溶液的粘度值和非诊断目的的细胞中粘度变化检测。

技术领域

本申请涉及小分子荧光探针领域，具体地，涉及一种检测粘度的大斯托克位移荧光探针及其制备和应用。

背景技术

粘度在生物微环境中起着至关重要的作用。细胞不同区域的粘度差异很大，因此也影响着各个区域中活性分子的扩散，如信号传递、物质运输、生化物质之间的相互作用等。多项研究发现，细胞粘度水平异常往往与各种疾病有关，如癌症、心血管疾病、抑郁症、糖尿病和阿尔茨海默病。因此，急需开发有效的检测细胞中粘度变化的工具，这对促进疾病预防和开展临床诊断具有重要作用。

相对于其他检测方法，荧光探针由于其制备方法简单、灵敏度高、活细胞/活体可视化等优点，已被用细胞/活体中粘度值的检测。然而，目前已报道的粘度荧光探针大多存在斯托克斯位移小的缺陷，容易具有严重的自淬灭现象，其检测结果受到仪器激发光的干扰，造成较大的测量误差。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种检测粘度的大斯托克斯位移荧光探针。

一种检测粘度的大斯托克斯位移荧光探针，探针分子式为C₂₆H₂₄N₂O，结构式如式(I)所示：

本申请还提供一种大斯托克斯位移荧光探针的制备方法，包括：

将化合物(2)和化合物(3)混合，加入乙腈及哌啶，在氮气保护下将混合物加热得反应液；将反应液旋干并分离纯化，制备得到所述的大斯托克斯位移荧光探针；

合成路线如下：

可选的，所述化合物(2)、化合物(3)和哌啶的摩尔比为1：1～1.5：0.1。

可选的，所述乙腈作为溶剂。

可选的，氮气保护下将混合物加热的反应条件为：60℃～80℃反应10～14小时。

可选的，所述分离纯化方法可如下：将反应液减压浓缩，利用硅胶柱层析法进行分离纯化，所用洗脱液为体积比为1：3的乙酸乙酯：石油醚，得到所述的荧光探针(I)。

本申请化合物(2)为公开的化合物，其制备方法可参考文献(Homma H,Harada S,Ito T,Kanda A,et al.Atypical dearomative spirocyclization ofβ-naphthols withdiazoacetamides using a silver catalyst[J].Organic Letters,2020,22:8132-8138.)。

本发明化合物(3)为公开的化合物，其制备方法可参考文献(Wu Y Y,Yu WT,Hou TC,et al.A selective and sensitive fluorescent albumin probe for thedetermination of urinary albumin[J].Chemical Communications,2014,50:11507-11480.)。

本申请还提供一种所述的大斯托克斯位移荧光探针在制备粘度检测产品中的应用。

可选的，所述粘度检测产品为粘度检测试剂或粘度检测试剂盒。