[发明专利]一种与美洲南瓜Cucurbita pepo L.叶片缺刻基因Cpdll连锁的Indel标记及其引物、试剂盒与应用在审
申请号: | 202110934939.5 | 申请日: | 2021-08-16 |
公开(公告)号: | CN113862386A | 公开(公告)日: | 2021-12-31 |
发明(设计)人: | 王长林;薄凯亮;段颖;邱喜岩 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01G22/05 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 美洲 南瓜 cucurbita pepo 叶片 基因 cpdll 连锁 indel 标记 | ||
1.一种与美洲南瓜Cucurbita pepo L.叶片缺刻基因Cpdll连锁的Indel标记,其特征在于,其相比叶片不缺刻基因CpDll对应连锁片段的第110-117位点存在碱基插入突变。
2.根据权利要求1所述的一种与美洲南瓜Cucurbita pepo L.叶片缺刻基因Cpdll连锁的Indel标记,其特征在于,所述插入突变的碱基为CTTGCCTG。
优选地,所述与美洲南瓜Cucurbita pepo L.叶片缺刻基因Cpdll连锁的Indel标记的核苷酸序列如Seq ID No.2所示;
优选地,所述叶片不缺刻基因CpDll对应连锁片段的核苷酸序列如Seq ID No.1所示。
3.用于筛选美洲南瓜Cucurbita pepo L.叶片缺刻基因Cpdll的引物,其特征在于,可扩增权利要求1或2所述的与美洲南瓜叶片缺刻基因Cpdll连锁的Indel标记。
4.根据权利要求3所述的用于筛选美洲南瓜Cucurbita pepo L.叶片缺刻基因Cpdll的引物,其特征在于,包含下述上下游引物对:
CpDLL-INDEL3-F:GCAAAACCCAAATGAGAAAG
CpDLL-INDEL3-R:AGCAGTGGAGATGGAGGAG。
5.用于鉴定携带有叶片缺刻基因Cpdll的美洲南瓜种质资源的试剂盒,其特征在于,包括可扩增权利要求1或2所述的与美洲南瓜叶片缺刻基因Cpdll连锁的Indel标记的引物,和/或,权利要求3或4所述的用于筛选美洲南瓜Cucurbita pepo L.叶片缺刻基因Cpdll的引物。
6.根据权利要求4所述的用于鉴别携带叶片缺刻基因Cpdll的美洲南瓜种质资源的试剂盒,其特征在于,所述引物包含下述上下游引物对:
CpDLL-INDEL3-F:GCAAAACCCAAATGAGAAAG
CpDLL-INDEL3-R:AGCAGTGGAGATGGAGGAG。
优选地,所述试剂盒还包括:PCR试剂,和/或,电泳试剂;
优选地,所述PCR试剂包括:dNTP,Taq酶,缓冲液,双蒸水;
优选地,所述电泳试剂包括:电泳缓冲液、Tris-HCl、SDS、丙烯酰胺、过硫酸胺、TEMED、双蒸水、银染试剂。
7.一种鉴定携带有叶片缺刻基因Cpdll的美洲南瓜种质资源的方法,其特征在于,采用权利要求3或4所述的用于筛选美洲南瓜Cucurbita pepo L.叶片缺刻基因Cpdll的引物,和/或,权利要求5或6所述的用于鉴别携带叶片缺刻基因Cpdll的美洲南瓜种质资源的试剂盒,对待测美洲南瓜材料进行检测。
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