[发明专利]一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法

权利要求书

1.一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，构建假象模拟诱导式靶细胞，对假象模拟诱导式靶细胞进行“节育”处理，使假象模拟诱导式靶细胞停留在G2期，得到细胞激活与诱导制剂；

S2，将细胞激活与诱导制剂添加在由静脉外周血中分离的免疫细胞的专属培育体系的激活与调节环节中；

S3，对免疫细胞进行识别受体激活与抑制受体降解，并有效扩增，纯化，得到NKG2D受体高表达KIR受体低表达的免疫细胞。

2.如权利要求1所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于：所述假象模拟诱导式靶细胞为不表达MHC-1的靶细胞或通过基因剪辑技术将表达MHC-1的靶细胞剪辑MHC-1形成的靶细胞。

3.如权利要求1所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于：所述免疫细胞为NK细胞和/或CTL细胞。

4.如权利要求1所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于：所述“节育”处理采用纳米量子并磁化照射技术、直线加速辐照技术和钴60辐照技术中的任意一种。

5.如权利要求1所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于，步骤S1中，对假象模拟诱导式靶细胞进行“节育”处理前，还包括诱导与刺激步骤，所述诱导与刺激步骤具体为：将诱导与刺激因子嵌合至假象模拟诱导式靶细胞表面；对嵌合诱导与刺激的因子的假象模拟诱导式靶细胞扩增培育。

6.如权利要求5所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于：所述诱导与刺激因子为IL-2、IL15、IL21、CD137中的一种或两种以上。

7.如权利要求1所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于：步骤S2中，免疫细胞的专属培育体系包括MNC细胞和细胞扩增培养液。

8.如权利要求7所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于，免疫细胞的培育步骤为：

1)第0天，将细胞激活与诱导制剂加入到免疫细胞的专属培育体系中，混合后，接种于培养瓶中，然后置于培养箱中进行培养；

2)培养至第7天，继续往步骤1)的培养瓶中加入细胞激活与诱导制剂进行培养；

3)培养至14天，得到免疫细胞。

9.如权利要求8所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于，培养箱的温度为37℃，CO₂浓度为5％；

所述培养瓶为T225培养瓶。

10.如权利要求8所述的一种可增强免疫识别受体降解抑制受体表达的方法，其特征在于，步骤1)中，免疫细胞的专属培育体系与细胞激活与诱导制剂的体积比为15-18:1；免疫细胞的专属培育体系中MNC细胞的量为5.8×10⁶～6.2×10⁶个/mL；

步骤2)中细胞激活与诱导制剂的添加量为步骤1)中细胞激活与诱导制剂的添加量的0.8-1.2倍。