[发明专利]一种黄嘌呤氧化酶抑制剂及其筛选方法和应用

说明书

本发明提供了一种黄嘌呤氧化酶(XO)抑制剂及其提取方法和应用，属于医药技术领域。本发明提供的黄嘌呤氧化酶抑制剂，包括泽兰色原烯、枯醇和1,5,8‑对薄荷三烯中的至少两种。本发明提供的XO抑制剂能够与XO的活性中心形成Pi‑烷基以及Pi‑Pi共轭双键，泽兰色原烯和枯醇能够与XO的活性中心形成范德华力，在上述分子间作用力存在的情况下，XO抑制剂被插入XO的疏水间隙中以占据其催化活性中心，从而阻碍了底物的进入并导致其失去原有的功能，具有抑制尿酸产生的作用，说明，泽兰色原烯、枯醇和1,5,8‑对薄荷三烯具有抑制XO的功能。为从天然产物中筛选XO抑制剂制备治疗XO介导的疾病的药物提供了新思路。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种黄嘌呤氧化酶抑制剂及其筛选方法和应用。

背景技术

痛风是一种嘌呤代谢紊乱或尿酸体内生成过多，而体外排泄减少引起的代谢性疾病。临床表现为高尿酸血症、痛风性关节炎、尿酸结石、痛风结石形成等。高尿酸血症是痛风疾病发展过程中的一个阶段；痛风性关节炎是血清尿酸水平增高后，尿酸沉积于关节组织引发的一系列炎症反应。

痛风的主要起因是：当体内尿酸生成增加或排泄减少时，可导致尿酸水平增加，当超过其溶解限度时，尿酸会沉积在关节和软组织，引起炎症反应。尿酸是人体嘌呤代谢的最终产物，黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase from buttermilk，XO)作为嘌呤代谢过程中的关键酶，先将次黄嘌呤氧化为黄嘌呤，再进一步氧化为尿酸。XO抑制剂一般与钼铁中心的催化活性位点结合，可逆或不可逆地抑制XO活性，防止底物发生羟化反应，减少尿酸生成，降低血清中尿酸的浓度，达到治疗高尿酸的效果。

葵花盘提取物具有降尿酸、抗痛风作用。然而，葵花盘提取物的化学成分复杂，目前还没有关于葵花盘提取物中化学成分为降尿酸、抗痛风的活性物质的研究。因此从葵花盘提取物中寻找疗效好、毒性小的降尿酸、抗痛风天然活性物质，是目前科研工作者亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种黄嘌呤氧化酶抑制剂及其筛选方法和应用，本发明提供的黄嘌呤氧化酶抑制剂对黄嘌呤氧化酶的抑制活性高且毒副作用小。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种黄嘌呤氧化酶抑制剂，包括泽兰色原烯、枯醇和1,5,8-对薄荷三烯中的至少一种。

本发明提供了上述技术方案所述黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选方法，包括以下步骤：

将葵花盘挥发油进行气相色谱-质谱分析鉴定，得到葵花盘挥发油的化学成分；

利用AutoDockVina软件将所述化学成分的三维结构分别与黄嘌呤氧化酶的三维结构中的钼铁活性中心进行分子对接，计算对接能量，得到黄嘌呤氧化酶抑制剂；所述黄嘌呤氧化酶抑制剂的对接能量为-6.6～-6.9Kcal/mol。

优选的，所述气相色谱-质谱分析鉴定的条件包括：色谱柱为HP-INNOWax毛细管柱；载气为氦气；进样器的温度为250～260℃；检测器的温度为280～300℃；烘箱在60～70℃下保持3～5min，然后以5～6℃/min的速度升至240～260℃后保温10～15min；电子离子模式为70～85eV；质谱记录范围为50～550amu；离子源温度为230～240℃。

本发明还提供了上述技术方案所述的黄嘌呤氧化酶抑制剂或上述技术方案所述筛选方法得到的黄嘌呤氧化酶抑制剂在制备治疗黄嘌呤氧化酶介导的疾病的药物中的应用。

优选的，所述制备黄嘌呤氧化酶介导的疾病包括高尿酸血症、痛风、2-型糖尿病和肿瘤中的一种或几种。