[发明专利]IgA肾病诊断标志物组合及其应用

说明书

本发明公开了IgA肾病诊断标志物组合及其应用。本申请的第一方面，提供定量检测基因ADIPOR2；CDK14；CYB561D1、CYB561D2中的至少一种；DOCK10；IL33；PCDH18、PCDH17中的至少一种；PLEKHG2、PLEKHG3中的至少一种；RASDRF2、RASGRF1中的至少一种；VIL1的试剂在制备IgA肾病的诊断试剂盒中的应用。本申请从全mRNA基因表达组数据中筛选得到上述9个基因的组合，基于这9个基因对受试者进行定量检测可以高效准确地诊断出是否患有IgA肾病。

技术领域

本申请涉及肾病检测技术领域，尤其是涉及IgA肾病诊断标志物组合及其应用。

背景技术

免疫球蛋白(IgA)肾病，由IgA复合物在肾脏沉积，导致肾脏局部自身免疫反应，引起肾组织病变，是一种最常见的原发性肾小球疾病。超过30％的患者在发病10-20年后进展至终末期肾脏病(ESRD)，使得IgA肾病成为引起尿毒症最常见的病因之一。目前IgA肾病诊断金标准为肾穿刺的病理组织活检，然而有创肾穿刺存在几个缺陷：(1)肾穿刺无法进行早期诊断，只能够检测发病的肾损伤已经形成的病人。(2)肾穿刺存在风险，因为许多病人存在肾穿刺相对禁忌症，或者医院不具备肾穿刺病理诊断的条件，而导致病人无法获得明确诊断并进行针对性的治疗。(3)肾穿刺医疗费用高，相当于一次手术，需要住院一个星期。因此临床上亟需开发有助于IgA肾病诊断或病情判断的无创性生物标志物。

IgA肾病诊断的生物标志物大致可以分为两类：免疫诊断标志物和基因诊断标志物。免疫诊断标志物是指蛋白质或抗体，而基因诊断标志物是指包含遗传性IgA肾病的基因突变和基因分型的DNA检测、mRNA基因表达、调控基因表达的miRNA等。现有的IgA肾病免疫诊断标志物通常特异性介于25％-75％，敏感性介于60％-90％。其中研究较多的有：(1)半乳糖缺陷IgA1(Gd-IgA1)分子；(2)针对Gd-IgA1的抗糖抗体；(3)IgA/C3比例，补体通路的补体C3；(4)所有IgA复合物的总信号。

由于免疫诊断标志物的特异性不高，近年来科研人员逐步在基因诊断领域利用mRNA、lncRNA、miRNA基因表达来建立IgA肾病的基因诊断标志物。例如，Chen利用基因表达综合数据库(GEO)的数据集GSE93789进行生物信息学数据分析，找到6个核心基因：JUN、C3AR1、FN1、AGT、FOS和SUCNR1。其中C3AR1为C3a受体，C3a是关键的炎症调控因子，参与细胞炎症反应；AGT为肾素-血管紧张素系统(RAS)唯一基底(substrate)，2012年KDIGO指南把RAS抑制剂作为IgA肾病标准治疗的基石；JUN及FOS属于基因AP-1的转录因子，AP-1调控细胞增殖、死亡、分化和炎症过程中的基因表达；FN1为非胶原糖蛋白和ECM的主要成分；而SUCNR1调控肾脏分泌肾素(renin)。Cui利用GEO数据集GSE37460进行生物信息学数据分析，发现6个核心基因：EGR1、ATF3、NR4A2、NR4A1、MAFF及KLF6与IgA肾病或高血压肾病有关。其中，EGR1是锌指(zinc finger)早期生长反应家族表达因子成员，调节巨核细胞中分化簇40配体(CD40L)表达，而CD40L在慢性肾病的发生发展中起重要作用；ATF3是ATF/CREB家族表达因子成员，通过与c-JUN蛋白作为同二聚体或异二聚体结合到DNA位点来调节转录；EGFR1和ATF3可调节炎症和免疫相关基因的表达。NR4A2和NR4A1是核激素受体亚家族的成员，参与细胞凋亡和癌变；MAFF与细胞应激反应有关；KLF6是一种含有三锌指基序的DNA结合蛋白，在肾集合管系统的发育过程中发挥作用。

然而上述这些研究中往往仅对单一基因诊断标志物进行筛选，而这些基因通常涉及多种生物进程，不足以独立应用于IgA肾病临床诊断，因此，有必要提供一种具有良好诊断价值的标志物组合。

发明内容

本申请旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本申请提出一种具有良好诊断价值的IgA肾病的基因诊断标志物组合，基于该组合的定量检测基因诊断标志物组合的试剂在制备IgA肾病的诊断试剂盒中的应用。