[发明专利]一种刺激真核藻类多糖的方法有效
申请号: | 202110938125.9 | 申请日: | 2021-08-16 |
公开(公告)号: | CN113549589B | 公开(公告)日: | 2023-01-03 |
发明(设计)人: | 钟玉鸣;刘晖;王琴;柳建良 | 申请(专利权)人: | 仲恺农业工程学院 |
主分类号: | C12N1/38 | 分类号: | C12N1/38;C12N1/12;C12P19/04;C12R1/89 |
代理公司: | 深圳市智胜联合知识产权代理有限公司 44368 | 代理人: | 齐文剑 |
地址: | 510225 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 刺激 藻类 多糖 方法 | ||
1.一种刺激小球藻产生多糖的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(11)将所述小球藻接种至培养基A中进行光培养;
(12)当COD和TN降解率分别达到70%和80%以上时,将所述小球藻转接至培养基B中进行暗培养;
其中,每升所述培养基A的组分为:硝酸钠0.24~0.48g,磷酸氢二钾0.05g,七水硫酸镁0.1g,水合氯化钙0.05g,乙酸钠1~2g,余量为水;
每升所述培养基B的组分为:硝酸钠0.24~0.48g,磷酸氢二钾0.05g,七水硫酸镁0.1g,水合氯化钙0.05g,乙酸钠0.5~0.8g,余量为水;
所述暗培养加入了添加剂,以所述培养基B为基准,所述添加剂由甘油5~10g,环糊精2~4g,甘氨酸1~2g,聚乙烯醇0.5~0.8g组成;
(21)将上述培养的小球藻接种于改性四氧化三铁填料中进行培养,当所述改性四氧化三铁填料附上的叶绿素a达到0.5~1mg/g填料时,培养完毕,得到培养后的填料;
(22)将所述培养后的填料接种于培养基C中,并引入食品废水进行培养;
其中,所述改性四氧化三铁填料的改性方法是:将四氧化三铁粉碎成100目的颗粒,然后以1:100的重量比浸泡于1M的稀盐酸中20~30min后,洗净至中性;然后与乙酸钠和柠檬酸钠的混合液混合搅拌进行改性,直至上清液pH为中性;
每升所述培养基C的组分为:硝酸钠0.24~0.48g,磷酸氢二钾0.05g,七水硫酸镁0.1g,水合氯化钙0.05g,乙酸钠0.5~0.8g;
步骤(21)中,所述改性四氧化三铁填料与所述小球藻的比例为1:100g/ml;所述培养是在150~200rpm、24h光照条件下培养3~5天;
所述乙酸钠和柠檬酸钠的混合液中,所述乙酸钠与所述柠檬酸钠的质量比为1:2。
2.根据权利要求1所述的刺激小球藻产生多糖的方法,其特征在于,步骤(11)中,所述小球藻接种至所述培养基A中时,所述小球藻与所述培养基A的质量比为(3~10):100。
3.根据权利要求1所述的刺激小球藻产生多糖的方法,其特征在于,所述光培养和所述暗培养的条件均是25~35℃,130~160rpm,培养时间为24h。
4.根据权利要求1所述的刺激小球藻产生多糖的方法,其特征在于,步骤(12)中,所述暗培养加入了所述添加剂时,是在超声频率45~65KHz、超声波功率为150W下处理10~20min。
5.根据权利要求1所述的刺激小球藻产生多糖的方法,其特征在于,步骤(12)中,所述暗培养中,所述小球藻细胞浓度为107~108个/ml。
6.根据权利要求1所述的刺激小球藻产生多糖的方法,其特征在于,步骤(22)中,以每升体积所述培养基C的重量为基准,所述培养后的填料接种重量为10%,引入所述食品废水进行培养分为三个阶段:
第一阶段是培养初期,所述食品废水的体积与所述培养基C的体积比为(20~30):100混合后进行培养;
第二阶段是当COD和TN降解率分别达到60-70%和75-80%以上,所述食品废水的体积与所述培养基C的体积比为(50~60):100混合后进行培养;
第三阶段是当COD和TN降解率分别达到70-75%和80-85%以上,以所述食品废水进行培养。
7.根据权利要求1所述的刺激小球藻产生多糖的方法,其特征在于,所述混合搅拌进行改性的步骤中,所述搅拌转速为150~200rpm,搅拌时间为10~20min。
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