[发明专利]一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法

权利要求书

1.一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)选择桑树的两年生实生苗进行盆栽；

(2)设置轻度Cd污染处理组、中度Cd污染处理组、重度Cd污染处理组和空白对照组；

(3)分别于桑树雀口期、缓慢生长期和旺盛生长期，分析桑树根际土壤微生态环境化学特征和生物学特征，并进行根际土壤总DNA提取、扩增和高通量测序。

2.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(1)中，所述桑树的品种为粤桑11号。

3.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(1)中，所述盆栽的用土为红壤土。

4.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(1)中，所述盆栽的条件为：温度为25±2℃，光照强度为3600lx，光照时间为12h，土壤湿度为70％。

5.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(2)中，所述轻度Cd污染处理组的土壤Cd浓度为1mg/kg。

6.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(2)中，所述中度Cd污染处理组的土壤Cd浓度为3mg/kg。

7.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(2)中，所述重度Cd污染处理组的土壤Cd浓度为5mg/kg。

8.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(3)中，所述微生态环境化学特征包括Cd含量、Cd形态、Cd有效态、pH值、有机质含量、全氮含量、全磷含量、全钾含量、有效磷含量和有效钾含量。

9.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(3)中，所述生物学特征包括微生物碳量、微生物氮量、土壤蔗糖酶含量、土壤脲酶活性、土壤碱性磷酸酶活性、土壤过氧化氢酶活性、土壤纤维分解强度、土壤呼吸强度和土壤硝化强度。

10.根据权利要求1所述的一种Cd胁迫对桑树根际土壤环境特征影响的评价方法，其特征在于，步骤(3)中，所述根际土壤总DNA提取、扩增和高通量测序的步骤具体为：将同一处理的样本预先进行混合，每个处理土壤称取0.5g，然后采用MP土壤试剂盒提取土壤总DNA，DNA提取质量利用1％琼脂糖凝胶电泳检测分析；随后对高质量的土壤DNA进行V3-V4可变区进行PCR扩增，所用引物为338F(5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3′)和806R(5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′)，每个处理重复3次；收集混合同一个处理的PCR产物，并用2％琼脂糖电泳定性和QuantiFluor^TM-ST定量检测后，挑取纯度高的PCR产物进行测序。