[发明专利]二甲基亚砜在制备提高昆虫病原线虫产量制剂中的应用

说明书

本发明公开了二甲基亚砜在制备提高昆虫病原线虫产量制剂中的应用。本发明发现，相比于PBS对照组，DMSO显著提高S.carpocapsae All或H.bacteriophora H06感染期线虫产量。因此，可以将DMSO用于提高S.carpocapsae All或H.bacteriophora H06感染期线虫产量，为获得商品化的昆虫病原线虫提供核心技术。

技术领域

本发明属于生物农药研发领域，具体涉及二甲基亚砜(DMSO)在制备提高昆虫病原线虫产量制剂中的应用。

背景技术

昆虫病原斯氏线虫属Steinernema和异小杆线虫属Heterorhabditis线虫是业已广泛用于防治农林、牧草、花卉和卫生等领域的害虫的天敌类杀虫制剂。这类线虫以3龄感染期虫态主动搜索寄主昆虫，对非靶标生物和环境安全，可规模化生产。昆虫病原线虫以感染期虫态随寄主食物或从昆虫的自然开口(如肛门、气门)、节间膜进入昆虫体内，随后释放肠腔中携带的Xenorhabdus属(与斯氏线虫Steinernema共生)或Photorhabdus属(与异小杆线虫Heterorhabditis共生)共生细菌致死昆虫。然后线虫利用共生细菌转化寄主体内的营养物质繁殖后代。

目前昆虫病原线虫培养方法主要有活体培养(In vivo)和离体培养(In vitro)。活体培养技术是利用昆虫寄主来培养昆虫病原线虫。离体培养主要包括固体培养和液体培养。固体培养是在含有海绵填充剂的培养基中加入单一共生细菌和无菌线虫构建的。液体培养主要是应用发酵罐系统培养昆虫病原线虫。不论是使用固体还是液体培养方法，昆虫病原线虫商业化培养的技术关键是如何获得高产量的线虫和降低线虫成本。

二甲基亚砜是一种即溶(DMSO)于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂，可作为农药的添加剂，同时也是一种渗透性保护剂，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。本发明发现，于线虫培养系统中添加二甲基亚砜有利于提高感染期线虫的产量。

发明内容

本发明的第一个目的是提供二甲基亚砜(DMSO)在制备提高昆虫病原线虫产量制剂中的应用。

本发明通过实验发现，于加入共生细菌的培养基中添加DMSO能提高昆虫病原线虫S.carpocapsae All和H.bacteriophora H06的产量。因此，本发明提供DMSO在制备提高昆虫病原线虫产量制剂中的应用。

本发明的第二个目的是提供一种提高昆虫病原线虫产量的方法，即将DMSO添加到业已加入相应共生细菌的昆虫病原线虫的培养基中，线虫繁殖后获得更高的感染期线虫产量。

优选的，所述昆虫病原线虫是S.carpocapsae All或H.bacteriophora H06。

优选的，所述DMSO的浓度是质量分数0.1％。

本发明发现，相比于PBS对照组，DMSO显著地提高S.carpocapsae All或H.bacteriophora H06感染期线虫产量。因此，可以将DMSO用于提高S.carpocapsae All或H.bacteriophora H06感染期线虫产量，获得具有成本优势的S.carpocapsae All或H.bacteriophora H06线虫。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

一、实验材料

1、二甲基亚砜(DMSO)：将DMSO以无菌PBS稀释成质量分数为0.1％，采用0.22μm过滤器过滤除菌后使用。

二、实验方法