[发明专利]蛔甙在制备H.bacteriophora H06感染期线虫恢复发育制剂中的应用

说明书

本发明公开了蛔甙在制备促进Heterorhabditis bacteriophora H06感染期线虫恢复发育制剂中的应用。本发明发现，相比于对照的共生菌菌液上清液，蛔甙能够显著地促进H.bacteriophora H06感染期线虫恢复发育，可以使用蛔甙诱导H.indica LN2感染期线虫恢复发育。因此，在线虫大量培养过程中，将蛔甙添加到业已加入含相应共生细菌的H.bacteriophora H06感染期线虫的培养基中，诱导感染期线虫恢复发育和生长。本发明为商品化生产具有成本优势的H.indica LN2线虫提供了核心技术。

技术领域

本发明属于生物防治领域，具体涉及蛔甙在制备Heterorhabditisbacteriophora H06感染期线虫恢复发育制剂中的应用。

背景技术

昆虫病原斯氏属Steinernema和异小杆属Heterorhabditis线虫(Entomopathogenic nematode)是国际上新型的高效生物杀虫剂。这类线虫具有杀虫能力强，杀虫谱广，能主动搜索寄主，对人畜、环境安全等优点，易于大量培养，并能与多种化学农药混用，对钻蛀及地下害虫特效。昆虫病原线虫肠道中携带的Xenorhabdus或Photorhabdus属共生细菌在感染期恢复发育、致死昆虫以及转化营养供线虫生长方面发挥重要作用。H.bacteriophora H06线虫采自我国山东，对苹果桃小食心虫Carposinaniponensis、草地和花生地多种蛴螬以及小地老虎Agrotis ypsilon具有良好的防治效果。

昆虫病原线虫的应用依赖其大量培养方法。目前这类线虫的培养方法包括活体培养(利用昆虫培养昆虫病原线虫)和离体培养(利用固体培养基和液体培养基培养并加入共生细菌的线虫培养方法)。在离体培养过程中，主要步骤是于线虫培养基中接入共生细菌，然后加入无污染感染期线虫种。感染期幼虫种的恢复比例影响线虫培养的工艺流程和成本。如果恢复率低，第一代成虫数量少，仅有少部分的共生细菌被取食，第一代成虫的后代则会因为营养充足不能形成感染期幼虫，造成感染期线虫产量低。因此如何提高接种感染期线虫恢复比例是昆虫病原线虫商业化培养的核心技术。

发明内容

本发明的第一个目的是提供蛔甙在制备促进H.bacteriophora H06感染期线虫恢复发育制剂中的应用。

本发明通过实验发现，蛔甙能够促进H.bacteriophora H06感染期线虫恢复发育。

因此，本发明提供蛔甙在制备促进H.bacteriophora H06感染期线虫恢复发育制剂中的应用，所述的蛔甙，其结构式如式1中ascr#1、ascr#2、ascr#3、ascr#5、ascr#6、ascr#7、ascr#8、ascr#9、ascr#10、ascr#11或ascr#12任一所示：

优选的，所述蛔甙是式1中的ascr#3、ascr#5、ascr#6、ascr#8、ascr#9或ascr#12。

本发明的第二个目的是提供一种诱导H.bacteriophora H06感染期线虫恢复发育的方法，是将蛔甙添加到含有共生细菌的H.bacteriophora H06感染期线虫培养基中，诱导其恢复发育；

所述蛔甙的结构式如式1中ascr#1、ascr#2、ascr#3、ascr#5、ascr#6、ascr#7、ascr#8、ascr#9、ascr#10、ascr#11或ascr#12任一所示。

优选的，所述蛔甙是ascr#2、ascr#3、ascr#5、ascr#6、ascr#7、ascr#8、ascr#9或ascr#12。

优选的，所述蛔甙在培养基中的浓度是0.04pM-0.04μM。