[发明专利]一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法

说明书

本发明公开了一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法，包括下列步骤：(1)在无菌条件下式采集脂肪；(2)将步骤(1)采集的脂肪搅碎，收集于离心管中，加入等体积的磷酸盐缓冲液，剧烈震荡后室温静置分层，收集上层部分用磷酸盐缓冲液洗涤；(3)加入1‑1.5倍体积的胶原酶消化，然后加入1‑1.5倍体积的含12‑14％血清DMEM‑LG终止消化，充分混均后室温静置12‑15min分层，去掉上层，离心，并收集下层部分；本发明的二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法可很好地将自体脂肪干细胞裂解液用于治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复。

技术领域

本发明涉及细胞工程技术领域，具体涉及一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法。

背景技术

随着人们物质生活水平的逐渐提高，吃饱穿暖对人们来说不再是难题，生活的富裕使得人们开始追求更高层面的生活。

细胞是我们人体的基本组成单位，人体衰老的原因就是体内细胞的衰老。随着年龄的增长，人体内细胞增殖和分化能力减弱，新生细胞补充不足，衰老细胞不能及时被替代。细胞的老化促使人体的各生理系统功能下降和衰变，从而导致各种疾病的发生，最终引起死亡。

干细胞是一类具有自我更新，多向分化的多潜能细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。

干细胞第一次从脂肪组织提取是在2001年的时候，用于在很多医疗应用都已被广泛承认，而且脂肪提取的难度不高、增加了脂肪干细胞的优势。自从那时候，脂肪干细胞的密集研究和成功的医疗应用已在全球广泛实施。

但是，目前干细胞治疗疾病还存在以下问题：

1、无法将自体脂肪干细胞裂解液用于治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复；

2、对于的方法治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的疗效较差，甚至起不到治疗效果；

3、技术不成熟，成本高。

基于上述情况，本发明提出了一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法，可有效解决以上问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法。本发明的二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法可很好地将自体脂肪干细胞裂解液用于治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复；且对于的方法治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的疗效好，治疗效果显著；且技术路线成熟，所用的脂肪组织来源广泛、取材容易且不涉及伦理问题，成本较低，便于大规模工业化生产。

为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是：

一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法，包括下列步骤：

(1)在无菌条件下式采集脂肪；

(2)将步骤(1)采集的脂肪搅碎，收集于离心管中，加入等体积的磷酸盐缓冲液，剧烈震荡后室温静置分层，收集上层部分用磷酸盐缓冲液洗涤；

(3)加入1-1.5倍体积的胶原酶消化，然后加入1-1.5倍体积的含12-14％血清DMEM-LG终止消化，充分混均后室温静置12-15min分层，去掉上层，离心，并收集下层部分；

(4)加入2.2-2.5倍体积的红细胞裂解液重悬3-5min，离心并弃上清；用PBS液清洗，采用50-60μm滤膜过滤后，向所得细胞中加含12-14％血清DMEM-LG培养液，离心收集细胞，并于100-120U/mL青霉素或链霉素、12-14％血清DMEM-LG中培养，即获得脂肪干细胞；

(5)将步骤(4)中获得的脂肪干细胞所述进行传代培养；