[发明专利]药物组合物及其在SMO突变性髓母细胞瘤中的应用

说明书

本发明属于髓母细胞瘤用药技术领域，具体涉及一种基于MK2206和CX4945的药物组合物及其在SMO突变性髓母细胞/细胞瘤中的应用。所述药物组合物包括MK2206和CX4945。联合使用MK2206和CX4945可以抑制Hedgehog通路中SMO和/或SUFU和/或PCTH1和/或PTCH2表达；或阻断SMO/AKT/CK2信号通路的信号传导；或抑制糖酵解通路中的PDK1和/或LDHA蛋白的表达从而有效抑制耐药型髓母细胞/细胞瘤生长。该药物组合物解决了SMO抑制剂产生耐药型髓母细胞/细胞瘤的问题，能有效作用于SMO突变型耐药型髓母细胞/细胞瘤。

技术领域

本发明属于髓母细胞/细胞瘤用药技术领域，具体涉及一种基于MK2206和CX4945的药物组合物及其在SMO突变性髓母细胞/细胞瘤中的应用。

背景技术

Hedgehog(Hh)信号通路在维持胚胎发育和成体组织稳态平衡中起重要的作用，Hh通路一旦发生异常调控，就会产生机体缺陷或者肿瘤等。在许多肿瘤中Hh信号通路都异常活跃，其中SMO是Hh信号通路中关键的信号转导分子，靶向SMO已经成为药物研究热点。目前已有SMO抑制剂进入临床使用治疗各种肿瘤，如Vismodegib(GDC-0449)已经被批准用于治疗晚期和转移性基底细胞癌。虽然不少肿瘤患者接受GDC-0449治疗后，临床治疗获得显著益处，但是也有些患者容易会产生耐药性。对这些耐药患者进行基因组分析，发现GDC-0449耐药性与Hh通路再活化有关，主要是SMO发生突变，导致SMO持续表达，Hh信号通路激活，导致药物作用失效。这些突变体主要有SMO-W535L和SMO-D473H等，其中SMO-W535L突变体不需要Hh激活就可以自我持续激活，SMO-D473H破环了GDC-0449药物与SMO相互作用结合靶点。国内外大量的研究工作，主要还是集中于利用模式生物果蝇，研究果蝇SMO的各种翻译后修饰作用；而对于SMO如何直接传导生物信号，与哪些蛋白质直接发生相互作用研究的比较少。SMO-W535L和SMO-D473H等突变体与野生型SMO之间直接传导信号通路的蛋白质存在怎么样的差异性都不清楚。

髓母细胞瘤/细胞是人颅内的一种恶性肿瘤，SMO性突变导致髓母细胞/细胞瘤增强了耐药性，现有的治疗药剂治疗或抑制效果不明显，如何控制和对SMO突变性耐药型髓母细胞/细胞瘤用药是亟待解决的技术问题。

发明内容

有鉴于此，本发明在于提供一种药物组合物及其应用。所述药物组合物在体外能有效抑制SMO突变性髓母细胞/细胞瘤的生长。

所述药物组合物包括MK2206和CX4945。

本发明清楚SMO分子在Hedgehog信号通路中直接相互作用的分子机制，特别是清楚突变体与野生型直接相互作用的差异性蛋白质；同时这针对这些蛋白质抑制或拮抗，更加抑制肿瘤细胞/细胞瘤生长，解决耐药性问题。

本发明中，三种不同的耐药型髓母细胞瘤ONS76-W535L,Daoy-W535L和原代150428-W535L细胞体外应用MK2206与CX4945联合筛选，应用CompSyn软件分析发现MK2206与CX4945联合用药具有协同作用，联合指数(CI)值小于1。体外克隆形成和细胞增殖实验中验证了SMO-W535L组各种不同细胞系中MK2206和CX4945之间都具有很好的协同联合抑制作用。MK2206+CX4945联合治疗不但可以有效抑制Hedgehog通路中的SMO表达外；同时还可以有效SUFU,PCTH1和PTCH2的表达；另外还可以有效抑制糖酵解通路中的PDK1和LDHA蛋白的表达。RNA-SEQ分析发现糖酵解通路在SMO(W535L)突变组中富集，高度激活。CO-IP的结果表明AKT与CK2,AKT与SMO之间有蛋白相互作用，表明信号轴为SMO/AKT/CK2，这也解释了SMO突变后AKT会异常激活的原因，SMO/AKT/CK2轴是耐药型髓母细胞瘤的信号传导方式，同时有效联合AKT抑制剂与CK2抑制剂可以用效抑制耐药型髓母细胞瘤的生长。

进一步，本发明还提供一种包含前述的药物组合物的制剂，所述制剂还包括其他药学上可接受的活性成分和/或载体。