[发明专利]波氏杆菌噬菌体培养基及培养方法

说明书

本发明涉及噬菌体培养技术领域，尤其涉及波氏杆菌噬菌体培养基及培养方法。本发明提供的培养基包括水和：多聚蛋白胨、酵母浸粉、胰蛋白胨、氯化钠和柠檬酸钠。该培养基能够实现对波氏杆菌噬菌体的大规模、高密度培养。实验表明，相对于其他组分组成的培养基，本发明提供的培养基能够更有效的培养波氏杆菌噬菌体，获得更高的放罐效价。

技术领域

本发明涉及噬菌体培养技术领域，尤其涉及波氏杆菌噬菌体培养基及培养方法。

背景技术

猪萎缩性鼻炎是一种慢性的呼吸道传染病，由支气管败血波氏杆菌和/或产毒素多杀性巴氏杆菌感染导致的。支气管败血波氏杆菌单独感染时，鼻腔病变较轻，如果支气管败血波氏杆菌和产毒素多杀性巴氏杆菌混合感染或继发感染时，则鼻腔病变很重。该病全年均可发生，春、秋两季发生较多，所有猪群都可感染，2-5月龄的猪只更易感染，以鼻甲骨萎缩和慢性鼻炎为特征。猪萎缩性鼻炎的死亡率不高，但患病猪生长迟缓，育肥时间会延长，种猪会携带病菌，丧失育种价值，这些都会给养猪场造成较大经济损失。

随着养猪生产的工业化和集约化程度的提高，猪萎缩性鼻炎发病率有增加趋势，影响仔猪的生长发育。目前，对猪萎缩性鼻炎主要采用抗生素和磺胺类药物治疗，例如：肌肉注射链霉素、氨苄青霉素，或者用卡那霉素鼻腔喷雾。上述方法可以杀灭病菌，减轻病情。但抗生素的长期使用会使猪产生抗药性，并易体内残留药物，所以用药方案还有待改善。

近年来，研究表明波氏杆菌噬菌体可以特异性裂解波氏杆菌，从而起到消灭病原阻断波氏杆菌相关疾病传播的作用。但若要将波氏杆菌噬菌体应用于波氏杆菌感染导致疾病的治疗中，则需要大量的波氏杆菌噬菌体。而噬菌体属于病毒，其培养宿主为细菌，且不同噬菌体的生长特性差异较大，很难针对不同噬菌体采用同一方法进行高密度培养。

目前，对波氏杆菌噬菌体，特别是多杀性波氏杆菌噬菌体的培养技术仍存在缺陷，无法实现波氏杆菌噬菌体的高密度培养。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供波氏杆菌噬菌体培养基及波氏杆菌噬菌体的高密度培养方法。

本发明提供的培养基包括水和：多聚蛋白胨10～20g/L、酵母浸粉1～5g/L、胰蛋白胨5～15g/L、氯化钠6g/L、柠檬酸钠1～10g/L。

一些实施例中，培养基由水和多聚蛋白胨10～20g/L、酵母浸粉1～5g/L、胰蛋白胨5～15g/L、氯化钠6g/L、柠檬酸钠1～10g/L组成。

一些具体实施例中，所述培养基由水和多聚蛋白胨15g/L、酵母浸粉5g/L、胰蛋白胨12g/L、氯化钠6g/L、柠檬酸钠8g/L组成。

一些实施例中，所述培养基中还包括波氏杆菌，所述波氏杆菌的密度为3×10¹⁰cfu。本发明中，所述巴氏杆菌噬菌体为分离自猪的波氏杆菌噬菌体。所述巴氏杆菌为分离自猪的巴氏杆菌。

本发明所述的培养基在波氏杆菌噬菌体培养中的应用。

本发明还提供了一种波氏杆菌噬菌体的培养方法，其将波氏杆菌和波氏杆菌噬菌体接种于本发明所述的培养基，然后进行培养。

所述培养方法中，先接入波氏杆菌，培养后再接入波氏杆菌噬菌体；

接入波氏杆菌噬菌体时，所述波氏杆菌和波氏杆菌噬菌体的数量比为60：1；

所述培养的条件包括：接入噬菌体后，静置30min，转速100rpm、通气12L/min、37℃、pH7.0培养10～15h。

本发明所述培养方法培养获得的波氏杆菌噬菌体培养液。

本发明还提供了一种治疗猪萎缩性鼻炎的药物，其由所述的波氏杆菌噬菌体培养液制得。