[发明专利]一种抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)抗原制备：提取银环蛇毒素，将银环蛇毒素进行灭活得到银环蛇毒素抗原；

2)免疫马匹：将步骤一制得的所述银环蛇毒素抗原免疫马匹，收集所述马匹的血清；

3)抗体提取：从步骤2)的血清中提取马IgG，经眼镜蛇毒素吸附，得到抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中银环蛇毒素进行灭活的方法为将银环蛇毒素用碘乙酰胺处理进行灭活。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中免疫马匹的方法为将灭活银环蛇毒与积羊毛脂石蜡油佐剂混合后注射马匹，收集免疫马匹的血清。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中抗体提取方法为用度硫酸铵去除血清中白蛋白，在用硫酸铵沉淀IgG，将沉淀复溶后透析除盐获得部分纯化的马IgG，将部分纯化的马IgG中加入甲醛灭活的大肠杆菌菌体和与CNBr激活琼脂糖偶联的眼镜蛇毒素，离心取上清利用蛋白A亲和层析柱纯化马IgG，得到抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体。

5.权利要求1-4任一所述的制备方法制备的抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体。

6.权利要求1-4任一所述的制备方法或权利要求5所述的抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体在制备检测银环蛇毒素产品中的应用。

7.一种银环蛇毒素检测试纸条，其特征在于，所述试纸条上包括权利要求5所述的抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体。

8.根据权利要求7所述的试纸条，其特征在于，所述试纸条由支撑板，样品垫，金标垫，检测膜和吸水垫构成，金标垫为吸附胶体金标记抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体溶液的玻璃纤维，检测膜为印迹银环蛇毒检测线T和质控线C的硝酸纤维素膜，检测线T为抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体印迹，质控线C为羊抗马IgG二抗印迹。

9.根据权利要求8所述的试纸条，其特征在于，所述胶体金标记抗银环蛇毒素特异性多克隆抗体溶液的制备方法为：将氯金酸水溶液加热煮沸，搅动下加入柠檬酸三钠水溶液，直到液体颜色稳定成葡萄酒红色，得到胶体金溶液，加入终浓度为抗银环蛇毒素特异性单克隆抗体，搅拌，加入BSA，搅拌，再加入PEG2000，搅拌后离心，取上清，将上清在再次离心取沉淀，将沉淀保存于四硼酸钠溶液中，得到银环蛇毒素特异性抗体标记的胶体金探针溶液。