[发明专利]一种迷你启动子pATP1B1及其应用有效
申请号: | 202110962272.X | 申请日: | 2021-08-20 |
公开(公告)号: | CN113652427B | 公开(公告)日: | 2023-08-29 |
发明(设计)人: | 路中华;王静怡;李田 | 申请(专利权)人: | 深圳市恩辑生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/864;C12N15/67;C12N15/64 |
代理公司: | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人: | 徐翔 |
地址: | 518055 广东省深圳市南山区西丽街*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 迷你 启动子 patp1b1 及其 应用 | ||
1.一种在神经元细胞特异性高效表达的迷你启动子pATP1B1,其特征在于,所述启动子pATP1B1长度为120bp,核苷酸序列如SEQID NO:1所示。
2.一种含有权利要求1所述启动子的重组腺相关病毒载体。
3.根据权利要求2所述重组腺相关病毒载体,其特征在于,所述重组腺相关病毒载体采用pAAV-hSyn-X作为骨架载体,将该载体中hSyn替换为pATP1B1启动子,得到重组腺相关病毒载体pAAV-pATP1B1-X,X是需要表达的蛋白序列。
4.根据权利要求2所述的重组腺相关病毒载体,其特征在于,所述重组腺相关病毒载体为pAAV-pATP1B1-荧光蛋白、pAAV-pATP1B1-功能性蛋白或pAAV-pATP1B1-治疗性蛋白中的一种;所述荧光蛋白为eYFP或tdTomato;所述功能性蛋白为光遗传相关蛋白或化学遗传相关蛋白。
5.根据权利要求2所述的重组腺相关病毒载体pAAV-pATP1B1-X的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将权利要求1所述的启动子pATP1B1基因片段两端分别加上限制性内切酶MluI-HF和BamHI-HF识别位点后人工合成;
(2)采用限制性内切酶MluI-HF和BamHI-HF处理pAAV-hSyn-X载体,同时用限制性内切酶MluI-HF和BamHI-HF处理pATP1B1片段;
(3)对两种酶切产物进行回收、纯化、连接,得到重组腺相关病毒载体pAAV-pATP1B1-X。
6.一种含有权利要求1所述启动子或权利要求2~4任意一项所述重组腺相关病毒载体的重组腺相关病毒。
7.一种含有权利要求1所述启动子或权利要求2~4任意一项所述重组腺相关病毒载体或权利要求6所述的重组腺相关病毒的试剂盒。
8.根据权利要求1所述启动子或权利要求2~4任意一项所述重组腺相关病毒载体或权利要求6所述的重组腺相关病毒或权利要求7所述的重组腺相关病毒的试剂盒在制备操控神经细胞、基因编辑和/或基因治疗试剂中的应用。
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