[发明专利]一种抗肿瘤联合用药的pH响应多肽水凝胶、制法及应用

说明书

本发明公开了一种抗肿瘤联合用药的pH响应多肽水凝胶、制法及应用，该多肽序列如下：VKVKVOVK‑Vsupgt;D/supgt;PPT‑KVEVKVKV‑NHsubgt;2/subgt;，其中V＝缬氨酸，K＝赖氨酸，O＝鸟氨酸，P＝脯氨酸，E＝谷氨酸，序列C端以氨基保护，在生理条件下自组装形成具有致密纳米网络微观结构的多肽水凝胶；本发明还公开了所述多肽水凝胶的制法和应用，本发明的多肽水凝胶作为抗癌药物紫杉醇和吉西他滨的共载药物递送系统，具有良好的pH响应性，到达病灶部位后先大量一次性释放吉西他滨，随后在肿瘤微环境的刺激下缓慢释放紫杉醇，达到协同抗癌作用。

技术领域

本发明属于生物材料技术领域，具体涉及一种抗肿瘤联合用药的pH响应多肽水凝胶、制法及应用。

背景技术

乳腺癌是女性人群中发病率最高的一种恶性肿瘤，临床上一般以放疗、化疗、内分泌治疗为主，其中化疗最为常用。目前治疗乳腺癌的一线药物包括紫杉类、蒽环类等，但使用单一的化疗药物难以取得较好的疗效。吉西他滨其代谢产物通过干扰DNA的复制阻断细胞周期进程，达到抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用。但吉西他滨半衰期较短，必须大剂量持续静脉给药才能维持有效的药用浓度，不良反应很大。而紫杉醇作为一种紫杉类抗肿瘤药物，通过抑制微管蛋白解聚，将肿瘤细胞的细胞周期阻滞于G₂/M期，最终使肿瘤细胞凋亡。吉西他滨和紫杉醇联合使用不仅可以抑制癌细胞不同生殖周期，还可以抑制降解吉西他滨降解酶的活性。

临床上多种药物的联合治疗往往需要几种制剂产品分开应用，药物在靶细胞上并不能发挥良好的协同作用，导致患者顺应性差，疗效降低。因此，将两种或多种药物载入同一递送系统上改善其药物代谢分布、生物利用度及协调两种不同药物的治疗方式显得尤为重要。然而紫杉醇是一种强脂溶性药物，吉西他滨是一种强水溶性药物，两者物理化学性质差别很大，使两者在载入同一递送系统上时受到很多的局限性；目前对紫杉醇和吉西他滨共载系统的研究主要有脂质体、纳米粒和无机-有机脂质纳米粒等，虽然促进了紫杉醇和吉西他滨的临床应用效果，但如何实现两药剂量控制的共载，如何更好地控制两药的释放以及如何实现给药的时序性等问题仍需要解决。

发明内容

发明目的：本发明针对紫杉醇和吉西他滨共载系统的剂量控制及给药时序性的问题，提供一种抗肿瘤联合用药的pH响应多肽水凝胶；还提供了上述多肽水凝胶的制法及应用。

技术方案：本发明的所述的一种抗肿瘤联合用药的pH响应多肽水凝胶，所述多肽的序列为VKVKVOVK-V^DPPT-KVEVKVKV-NH₂，其中V＝缬氨酸，K＝赖氨酸，O＝鸟氨酸，P＝脯氨酸，E＝谷氨酸；序列C端以氨基保护。

优选的，所述抗肿瘤联合用药的pH响应多肽水凝胶为致密纳米网络微观结构，纤维间隙包裹抗肿瘤小分子药物，形成包裹抗癌组合药物的抗肿瘤联合用药的pH响应多肽水凝胶。

优选的，所述多肽的合成方法为：

(1)多肽C端首个氨基酸连接到树脂上：将用Fmoc保护的氨基酸、HBTU、HOBt和DIPEA溶于DMF中，加入到含有树脂的多肽反应器中，将首个氨基酸C端连接到溶胀的Rink树脂上；

(2)Fmoc保护基的脱除：在DCM充分鼓吹下，脱去首个氨基酸的Fmoc保护基；

(3)氨基酸偶合：将活化剂HBTU加入到多肽反应器中，用DCM洗涤完成偶合；

(4)重复步骤(2)和步骤(3)，按照设计的序列，依次引入对应的氨基酸；

(5)肽链的切割：以TFA/TIS/EDT/H₂O作为切割剂，离心沉降得到多肽粗品；

(6)多肽的纯化：采用反相高效液相色谱法进行分析纯化，得到多肽。