[发明专利]外泌体提取方法、应用该外泌体的精华液及精华液应用在审
申请号: | 202110965850.5 | 申请日: | 2021-08-23 |
公开(公告)号: | CN113699104A | 公开(公告)日: | 2021-11-26 |
发明(设计)人: | 高翔;李纬国;李冉;何泳恒 | 申请(专利权)人: | 上海太安堂生物医学有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K8/99;A61Q19/00;A61Q19/02;A61K8/44;A61K8/49;A61K8/67;A61K8/73;A61K8/88 |
代理公司: | 南昌金轩知识产权代理有限公司 36129 | 代理人: | 杨丽 |
地址: | 200333 上海市普陀区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 外泌体 提取 方法 应用 精华液 | ||
1.一种外泌体提取方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:将生物来源干细胞置于培养基中培养至对数生长期,收集细胞培养上清液;将上清液300g离心8-11min后,留存上清;2000g离心13-16min后,留存上清;10000g离心28-31min后,留存上清;100000g离心69-72min后,弃去上清,使用重悬溶液重悬,100000g离心69-72min,弃去上清,使用重悬溶液重悬,将重悬液置于超滤离心管中浓缩,得外泌体。
2.根据权利要求1所述的一种外泌体提取方法,其特征在于:所述干细胞为人脐带间充质干细胞;所述培养基为Xeno-Free人间充质干细胞培养基。
3.根据权利要求1所述的一种外泌体提取方法,其特征在于:所述重悬溶液为经0.22μm滤器滤过的PBS溶液。
4.一种应用如权利要求1-3任一所述外泌体的精华液,其特征在于,所述精华液由以下重量百分比的原料溶解混合而成:
去离子水余量。
5.根据权利要求4所述的一种应用外泌体的精华液,其特征在于,所述精华液由以下步骤制得:将烟酰胺、尿囊素和氨甲环酸加入少量去离子水中,充分溶解后,加入聚谷氨酸钠充分溶解,再加入透明质酸钠充分溶解后,加入外泌体混合后定容,得精华液。
6.根据权利要求5所述的一种精华液的制备方法,其特征在于:所述精华液经0.22μm滤器滤过,无菌分装后冷藏存储。
7.根据权利要求6所述的一种精华液的制备方法,其特征在于:所述精华液分装至西林瓶中,置于2-8℃的环境中冷藏存储。
8.一种如权利要求4-7任一所述的精华液的应用。
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