[发明专利]一种产胞外多糖培养基及其应用

权利要求书

1.一种用于培养重组大肠杆菌RBATCC3-EC100以生产胞外多糖的培养基，其特征在于所述产胞外多糖培养基组成为：10 g/L胰蛋白胨，5 g/L酵母提取物，18 g/L NaCl，18 g/LMgCl₂，18 g/L K₂SO₄，12 mL/L 甘油，15 g/L琼脂，溶剂为水，pH6.8-7.2。

2.一种权利要求1所述产胞外多糖培养基在产胞外多糖中的应用，其特征在于所述应用为：将重组大肠杆菌RBATCC3-EC100划线接种至所述产胞外多糖培养基平板上，30-40℃培养10-30 h，刮取平板上菌体和胞外多糖的混合物，用PBS重悬；加入3倍体积的无水乙醇充分混匀，于4℃冰箱沉淀过夜，再在6000 rpm离心20 min；最后将沉淀冷冻干燥成粉末状，即为胞外多糖。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述重组大肠杆菌RBATCC3-EC100接种前先进行活化培养，所述活化培养为：从-80℃保存的重组大肠杆菌RBATCC3-EC100划线在含50 μg/ml卡那霉素的LB固体平板上，37℃培养24 h后；挑取单菌落至含50 μg/ml卡那霉素的3ml LB液体培养基的试管中，置于恒温震荡培养箱中，37℃过夜培养；将菌液按照体积比1：100比例转接至新鲜的含50 μg/ml卡那霉素LB液体培养基中继续培养至OD_{600 nm} =0.5，再划线接种至产胞外多糖培养基。