[发明专利]工程化免疫细胞

说明书

本发明提供一种可以同时靶向CD5和肿瘤抗原的双靶点工程化免疫细胞，以降低发生免疫排斥的风险。具体地，本发明提供一种工程化免疫细胞，其包含靶向CD5的抗体和靶向肿瘤抗原的抗体，其中所述靶向CD5的抗体和所述靶向肿瘤抗原的抗体位于同一嵌合抗原受体中或位于两个不同的嵌合抗原受体。

技术领域

本发明属于免疫治疗领域。更具体地，本发明涉及表达双靶点嵌合抗原受体的工程化免疫细胞，及其在治疗疾病中的用途。

背景技术

近几年，癌症免疫治疗技术发展迅速，尤其是嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)相关的免疫疗法，作为一种新型的过继性免疫治疗技术，已经在多种实体肿瘤和血液肿瘤的治疗中显示出非常显著的临床疗效。

然而，CAR-T细胞在临床应用中仍然面临很大的挑战，其中困难之一就在于免疫排斥。当外源性的CAR-T细胞进入患者体内时，会激活患者体内的免疫系统，引起免疫细胞例如T细胞、NK细胞等的杀伤，进而影响CAR-T细胞的存活和持久性，最终影响CAR-T细胞的治疗效果。

因此，本发明旨在提供一种同时靶向肿瘤抗原和CD5的双靶点工程化细胞，其一方面可以通过靶向肿瘤抗原对肿瘤细胞进行杀伤，另一方面也可以通过靶向T细胞标志物CD5对患者体内T细胞进行一定程度的杀伤，进而降低免疫排斥的风险。

发明内容

在一个方面，本发明提供一种同时靶向CD5和肿瘤抗原的工程化免疫细胞，其包含靶向CD5的抗体和靶向肿瘤抗原的抗体。

在一个实施方案中，所述靶向CD5的抗体和所述靶向肿瘤抗原的抗体位于同一嵌合抗原受体中。在该实施方案中，所述靶向CD5的抗体和所述靶向肿瘤抗原的抗体通过接头连接，优选地，所述接头包含(G4S)n，其中n为1、2、3、4、5或6，或者所述接头包含氨基酸序列(EAAAK)n或由其组成，其中n为1、2、3、4、5或6。

在另一个实施方案中，所述靶向CD5的抗体和所述靶向肿瘤抗原的抗体位于两个不同的嵌合抗原受体中。在该实施方案中，所述两个不同的嵌合抗原受体可以位于同一载体(例如，通过2A肽连接)或位于不同载体中。

在一个实施方案中，所述嵌合抗原受体还包含跨膜结构域和胞内信号传导结构域，所述胞内信号传导结构域包含共刺激结构域和/或初级信号传导结构域。

在一个实施方案中，本发明的嵌合抗原受体包含的跨膜结构域选自以下蛋白质的跨膜结构域：TCRα链、TCRβ链、TCRγ链、TCRδ链、CD3ζ亚基、CD3ε亚基、CD3γ亚基、CD3δ亚基、CD45、CD4、CD5、CD8α、CD9、CD16、CD22、CD33、CD28、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137和CD154。

在一个实施方案中，本发明的嵌合抗原受体包含的初级信号传导结构域选自以下蛋白的胞内区：FcRγ、FcRβ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD3ζ、CD22、CD79a、CD79b和CD66d。

在一个实施方案中，本发明的嵌合抗原受体还包含一个或多个共刺激结构域，其选自以下蛋白质的胞内区：CD94、LTB、TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、CARD11、CD2、CD7、CD8、CD18、CD27、CD28、CD30、CD40、CD54、CD83、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)、CD270(HVEM)、CD272(BTLA)、CD276(B7-H3)、CD278(ICOS)、CD357(GITR)、DAP10、DAP12、LAT、NKG2C、SLP76、PD-1、LIGHT、TRIM、ZAP70以及它们的组合。

在一个实施方案中，本发明的嵌合抗原受体包含的抗体选自Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fd′、Fv、scFv、sdFv、单域抗体和纳米抗体；优选选自scFv、单域抗体和纳米抗体。