[发明专利]一种同时鉴定辣椒雄性不育三系杂交种恢复性和真实性的分子标记及其鉴定方法有效
| 申请号： | 202110982915.7 | 申请日： | 2021-08-25 |
| 公开（公告）号： | CN113637791B | 公开（公告）日： | 2023-05-30 |
| 发明（设计）人： | 林多;刘潇蔚;杨延杰;王辉;朱文莹;代佳汐 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人： | 王晓晓 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 同时 鉴定 辣椒 雄性不育 杂交种 恢复 真实性 分子 标记 及其 方法 | ||
1.利用分子标记CR-S-01或者分子标记CR-S-02同时进行辣椒雄性不育三系杂交种恢复性和真实性的鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法包括以下步骤：
（1）提取辣椒雄性不育三系杂交种及其父本、母本的基因组DNA；
（2）以步骤（1）中的基因组DNA为模板，利用分子标记CR-S-01或者分子标记CR-S-02进行PCR扩增，PCR产物进行凝胶电泳检测；
（3）将辣椒雄性不育三系杂交种及其父本、母本的扩增条带进行比对，若在辣椒雄性不育三系杂交种中出现共显性标记，则判断其为亲本的真实杂交种且含雄性不育恢复基因；
所述分子标记CR-S-01的序列为：
CR-S-01 F：CTCCCTTATGTGCTAACTTTTGG；
CR-S-01 R：ATCTTCTTCATCAGCTTCCTCCT；
所述分子标记CR-S-02的序列为：
CR-S-02 F：CTCCCTTATGTGCTAACTTTTGG；
CR-S-02 R：ATTCATCTTCTTCATCAGCTTCC；
所述共显性标记为辣椒雄性不育三系杂交种中同时显示出母本与父本的互补条带。
2.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，所述步骤（3）中，若在辣椒雄性不育三系杂交种中仅出现父本的扩增条带，则判断其为亲本的假杂交种且含雄性不育恢复基因；若在辣椒雄性不育三系杂交种中仅出现母本的扩增条带，则判断其为亲本的假杂交种且不含雄性不育恢复基因。
3.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，所述基因组DNA提取自辣椒雄性不育三系杂交种及其父本、母本的种子或者植株叶片。
4.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，所述步骤（2）中PCR扩增条件为：95℃预变性 5min；95℃变性 30s，58℃退火15s，72℃延伸1min，重复35 个循环；72℃总延伸5min，4℃保存。
5.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，所述辣椒雄性不育三系杂交种为色素加工型辣椒雄性不育三系杂交种。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于青岛农业大学，未经青岛农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110982915.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
