[发明专利]多肽、三聚体、SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂和检测试剂盒

说明书

本发明涉及一种多肽、三聚体、SARS‑CoV‑2中和抗体的检测试剂和检测试剂盒。该多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。上述多肽与SARS‑CoV‑2刺突蛋白受体的亲和力较好，可以应用于SARS‑CoV‑2中和抗体的检测试剂和检测试剂盒中。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，特别是涉及一种多肽、三聚体、SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂和检测试剂盒。

背景技术

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coro-navirus 2，SARSCoV-2)属于β属的新型冠状病毒，圆形或椭圆形，直径60～140nm，电镜下呈皇冠样形状。

SARS-CoV-2表面的棘突蛋白(spike protein，简称S蛋白)是冠状病毒表面重要的受体结合位点，其可与细胞表面病毒特异性受体结合、介导病毒外膜与细胞融合、病毒吸附及穿膜；冠状病毒S蛋白受体结合域(receptor binding domain，RBD)可使病毒与宿主细胞表面的血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme2，ACE2)结合，并使病毒进入宿主细胞。当SARS-CoV-2在侵入机体时，会刺激机体产生具有保护作用的中和抗体，专门阻止病原微生物进入细胞，防止感染。中和抗体是由适应性免疫应答细胞分泌的一种可溶性蛋白，具有识别病毒表面蛋白、阻断其与细胞表面特异性受体结合的功能，从而发挥抗病毒作用。中和抗体的多少是疫苗免疫保护效果的一项重要指标，是疫苗评估和质控的重要依据。

目前用于检测SARS-CoV-2中和抗体的试剂盒，多运用竞争法原理，利用重组S蛋白或S蛋白的RBD片段、和刺突蛋白受体来检测待测样本中的SARS-CoV-2中和抗体。然而，目前的重组S蛋白或S蛋白的RBD片段、和刺突蛋白受体的亲和力较差，从而使得目前检测SARS-CoV-2中和抗体的试剂盒的检测准确性较差。

发明内容

基于此，有必要提供一种与刺突蛋白受体的亲和力较好的多肽。

此外，还提供一种对刺突蛋白受体的亲和力好的上述多肽的三聚体、含有上述多肽和/或上述三聚体的SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂和检测试剂盒。

一种多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

上述多肽通过选取S蛋白第331位氨基酸至第583位氨基酸的多肽，并进行Q498Y突变，使得该多肽片段不仅能与SARS-CoV-2刺突蛋白受体特异性结合，而且其与刺突蛋白的亲和力还高于天然RBD对刺突蛋白受体的亲和力。

一种三聚体，所述三聚体由三条权利要求1所述的多肽聚合而成。

在其中一个实施例中，所述多肽通过三官能团的交联剂聚合。

在其中一个实施例中，所述交联剂选自三-(琥珀酰亚胺)氨基三乙酸酯、三-(2-马来酰亚胺基乙基)胺、硫代琥珀酰亚胺基[2-6-(生物素酰胺)-2-(p-叠氮苯甲酰氨基)-己烷酰胺]乙基-1-3′-二硫丙酸酯及β-[三(羟基甲基)膦基]丙酸中的至少一种。

一种SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂，包括上述多肽和/或上述三聚体。

在其中一个实施例中，所述三聚体与固相载体缀合。

一种SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂盒，包括上述的三聚体、和能与所述三聚体特异性结合的竞争性物质，所述竞争性物质标记有信号物质。

在其中一个实施例中，所述竞争性物质为所述三聚体的抗体或SARS-CoV-2刺突蛋白受体。

在其中一个实施例中，所述竞争性物质包括人抗体Fc片段和连接在所述人抗体Fc片段上的两条氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的多肽片段。