[发明专利]一种小分子铁皮石斛多糖制备方法及其用途

说明书

一种小分子铁皮石斛多糖的制备方法，以铁皮石斛干制品为起始原料，通过低共熔溶剂与亚临界提取，最终得到小分子铁皮石斛多糖。通过该小分子铁皮石斛多糖的制备方法能制备得到分子量小于等于50kD的铁皮石斛多糖，而且分子量小于等于50kD的铁皮石斛多糖还具有纯度高及提取率的优点。该小分子铁皮石斛多糖分子量小于等于50kDa的铁皮石斛多糖分子量小、纯度高，有利于皮肤吸收，能显著改善皮肤免疫屏障功效且具有良好的抗炎功效。

技术领域

本发明涉及天然产物功效成分提取技术领域，特别涉及一种小分子铁皮石斛多糖制备方法及其用途。

背景技术

铁皮石斛为药食同源-兰科石斛属多年附生草本植物，也是2020版《中国药典》收录的石斛品种之一，被誉为“中华九大仙草之首”，全世界范围内的石斛种类约1000种，我国有74种，我国主要产地为浙江、云南、安徽等地，其中以云南种植面积最多。

传统中医及临床医学研究认为铁皮石斛具有益胃生津、滋阴清热、增加免疫力、抗肿瘤等功效，已被开发成具有多种功效的药品、功能食品。铁皮石斛中含有多糖、生物碱、氨基酸、菲类化合物等活性成分，在皮肤外科用药及化妆品领域中，铁皮石斛中多糖活性成分因具有保湿、抗氧化、延缓衰老等功效，已经开发出多种功能化妆品，同时铁皮石斛提取物已被收录在2021版化妆品原料目录中，明确其作为化妆品原料用途。

铁皮石斛多糖传统提取方法包括热水提取、酶法提取、超声波提取、微波提取、碱法提取等。其中热水提取、酶法提取方法成本低，对设备要求较低，应用较为广泛。超声波提取、微波提取等方法对设备要求高，碱法提取对多糖结构破坏较大。由于铁皮石斛具有较厚的植物细胞壁，常规提取方法难以直接穿透细胞壁，以释放更多的胞内石斛多糖。而且因为铁皮石斛多糖中含有较多的蛋白质，形成结构紧密的多糖蛋白结构，目前对铁皮石斛多糖去除蛋白方法包括蛋白酶法、Sevage法、三氯乙酸法和硫酸铵沉淀法，其中后三种方法容易造成多糖降解。

研究证实铁皮石斛多糖分子量范围从几千到百万不等，与其提取、分离纯化工艺密切相关，铁皮石斛多糖分子量大小对活性影响较大。现有技术中的工艺制备的铁皮石斛多糖不能满足分子量小、提取率及纯度要求。

因此针对现有技术不足，提供一种小分子铁皮石斛多糖的制备方法及应用以解决现有技术不足甚为必要。

发明内容

本发明的其中一个目的在于避免现有技术不足之处而提供一种小分子铁皮石斛多糖制备方法，该方法可制备高纯度的、分子量小于等于50kD的铁皮石斛多糖,且该制备方法铁皮石斛多糖的提取率高。

本发明的上述目的通过以下技术措施实现：

提供一种小分子铁皮石斛多糖的制备方法，采用低共熔溶剂结合亚临界方式提取。

本发明的小分子铁皮石斛多糖的制备方法，向铁皮石斛药渣中加入低共熔溶剂，进行亚临界提取得到初始滤液，再经酶解、洗脱、浓缩、析出得到成品小分子铁皮石斛多糖。

低共熔溶剂的氢键受体为甜菜碱，氢键供体为甘油、丙二醇或者丁二醇，氢键受体和氢键供体的摩尔比为1:1～1:5。

本发明的小分子铁皮石斛多糖的制备方法，具体包括如下步骤：

步骤一、向铁皮石斛干制品中依次通入水蒸气、高温蒸汽，然后加入无水乙醇、过滤，得到铁皮石斛药渣；

步骤二、向铁皮石斛药渣中加入低共熔溶剂，进行亚临界提取，然后经过滤、离心得到初始滤液；

步骤三、对初始滤液进行高压均质处理和酶解处理，酶解处理后加热得到多糖酶解液，然后对多糖酶解液超滤，收集滤过液；

步骤四、将步骤三得到的滤过液通过离子交换树脂脱色、脱蛋白吸附处理后，得到洗脱液；