[发明专利]β-胡萝卜素和维生素A的同步检测方法及其检测装置在审
申请号: | 202110989339.9 | 申请日: | 2021-08-26 |
公开(公告)号: | CN113759039A | 公开(公告)日: | 2021-12-07 |
发明(设计)人: | 杨艳玲;董慧;陈泽辉;马乐;杨元凯 | 申请(专利权)人: | 杨艳玲;深圳爱湾医学检验实验室 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 深圳市六加知识产权代理有限公司 44372 | 代理人: | 李于明 |
地址: | 100000 北京市西城*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胡萝卜素 维生素 同步 检测 方法 及其 装置 | ||
1.一种β-胡萝卜素和维生素A的同步检测方法,其特征在于,包括:
建立β-胡萝卜素以及维生素A的标准曲线;
在待检测的生物样品中加入内标物,形成第一混合物;
向所述第一混合物加入蛋白沉淀剂,充分混合均匀后形成第二混合物;
振荡所述第二混合物,使所述第二混合物中的蛋白质发生沉淀,形成固液混合样品;
萃取所述的固液混合样品中的目标组分,所述目标组分包括:β-胡萝卜素和维生素A;
对所述目标组分进行高效液相色谱检测,获得在第一检测波长、第二检测波长和第三检测波长下的检测结果;
根据所述β-胡萝卜素的标准曲线、第一检测波长和第三检测波长下的检测结果,计算所述β-胡萝卜素在所述待检测的生物样品中的浓度;并且
根据所述维生素A的标准曲线、第二检测波长和第三检测波长下的检测结果,计算所述维生素A在所述待检测的生物样品中的浓度。
2.根据权利要求1所述的同步检测方法,其特征在于,所述蛋白沉淀剂取自甲醇或乙腈中的一种或者多种;所述第一混合物的振荡时间为10分钟。
3.根据权利要求1所述的同步检测方法,其特征在于,所述萃取所述固液混合样品中的目标组分,具体包括:
向所述固液混合样品中加入萃取剂,充分混合均匀后形成第三混合物;
振荡所述第三混合物,形成第四混合物;
对所述第四混合物进行离心处理,分离取出含有所述目标组分的萃取相;
在氮气环境下干燥所述萃取相,获得干燥的目标组分。
4.根据权利要求3所述的同步检测方法,其特征在于,所述萃取剂包括:含4-8个碳原子的烷烃;
所述离心处理的离心力为10000-15000g,离心时间为10分钟。
5.根据权利要求3所述的同步检测方法,所述在氮气环境下干燥所述萃取相,具体包括:
将所述萃取相置于金属干浴式氮吹仪中,通过氮气吹扫的方式干燥;所述金属干浴式氮吹仪的温度设置为20-50℃,氮吹时间为10分钟。
6.根据权利要求4所述的同步检测方法,其特征在于,所述对所述目标组分进行高效液相色谱检测,具体包括:
向所述干燥的目标组分加入复溶剂,重新溶解所述目标组分形成第五混合物;所述复溶剂为二元有机溶剂;
将所述第五混合物上机,进行高效液相色谱检测;
使用二极管阵列检测器获取所述第三混合物在所述第一检测波长、第二检测波长和第三检测波长下的检测结果。
7.根据权利要求6所述的同步检测方法,其特征在于,所述复溶剂选自甲醇、乙腈、丙酮或者二氯甲烷;
所述高效液相色谱检测的流动相选自乙腈、水或者异丙醇中的一种或者多种;所述高效液相色谱检测的采集时间为20分钟;
所述内标物为苏丹Ⅰ,所述第一检测波长为455nm,所述第二检测波长为325nm;所述第三检测波长为477nm。
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