[发明专利]基于动物器官或组织构建的免疫组化质控品

说明书

本发明涉及病理学检查领域，特别涉及基于动物器官或组织构建的免疫组化质控品。本发明提供的方案中，猪的组织器官在部分免疫组化检测用途上可有效替代人体器官组织作为对照品的来源。材料市场便于获取，有利于将来商业化生产基于组织形态和免疫组化检查用途的质控品。按照基本的组织学制作要求，如用10％中性缓冲福尔马林固定，组织自动脱水处理仪等即可完成质控品蜡块的制作。有利于实现规范化操作。无需特殊方法和改变检查路径，简便易行。

技术领域

本发明涉及病理学检查领域，特别涉及基于动物器官或组织构建的免疫组化质控品。

背景技术

临床免疫组织化学检查(immunohistochemistry，免疫组化)可辅助肿瘤的良恶性诊断和指导用药。运用已知商业化抗体来检测肿瘤抗原。免疫组化作为临床病理不可替代的诊断工具，其检测结果将直接影响病理诊断的准确性。

然而由于商业化抗体序列保密，抗体质量(良莠不一)无法实现统一。因此需要对临床免疫组化用途的(抗人)抗体质量采用质控品确认。同时免疫组化检测(抗原抗体反应)受到多因素的影响(包括温湿度、浓度、批间差和人员操作等)，极易发生变化而导致结果偏差。故迫切需要质控品来监控免疫组化检测过程的质量问题。由于抗体销售商没有提供质控品，检测方也无法提供，目前大部分实验室的免疫组化检测结果仅凭判读者对结果“现象”的主观解读，常出现结果不一致的情况。

基于上述情况，国家病理质控中心提出免疫组化(阴阳性)对照的运用。目前室间质控常使用临床已确诊病理切片作为对照片发放测试，并明确标识质控用途而非商业交易(*人源性，伦理限制)。不过数量有限，每次只限于少部分实验室，检测结果有变异而致褒贬不一。

免疫组化如同检验(化验血液)结果一样，需要有质控品校准，才能确保检测质量。但是供应商和第三方均因伦理学限制，无法提供质控品。

免疫组化组织质控品的一般原则要求如下：(1)实现组织学对照目的：能够实时帮助判读者(病理医师)确认免疫组化结果的真实性(真假阴、阳性)；(2)具体要求：具有显微镜下明确的细胞形态定位特征(核、浆、膜)，可作为结果判读的参考标准；(3)具有便于判读者区分的特征标识或形态；(4)可实现标准化，能够统一量产；(5)符合伦理学要求。

目前临床上缺乏商用的免疫组化组织质控品，抗体的生产商也不能提供出厂所需的质控品(由于需求量太大，来源受限)。国内外可能商业化的免疫组化对照报道(非人源性材料)有几大类：

①蛋白多肽：文献中较早报道多肽凝胶对照(无细胞形态学结构特征)，以不同质量浓度的形式滴在待检切片上，染色过程中可出现棕色深浅信号。但无法给出明确的基于细胞形态学定位的评判。达不到组织质控品的预期用途。

②阳性细胞株：由供应商培养的细胞株。但是细胞株的培养传代存在变异，并极易受到影响，所以不能量产普及推广。如临床乳腺癌Her2(4B5)抗人抗体检测，供应商曾在早期提供细胞株对照，不过后来很快就停止供应。

③类器官：具有类似人体器官的细胞成分和结缔组织中间丝成分，但是无体内环境和体液调控，运用数据和效果未知。目前尚无市场化供应。

④移植瘤：在裸鼠身上种植人体的肿瘤细胞，以成瘤造模。目前肿瘤仍然存在极大的不确定性，尚无市场途径供应。上述提到的免疫组化对照的商业化尝试，均未成功。

行业规范及病理科质量管理要求(如等级医院评审)促使病理科内部制作质控品。实验室自行制作人源性“质控品”。人类Hala细胞，携带相关癌基因蛋白。但无法实现各个器官的细胞复制。目前尚没有用于临床免疫组化的报道。

1.实验室人源性细胞悬液(人源属性)，尝试在样本免疫组化切片上滴加液态对照，提供检测过程及检测质量是否可靠的线索证据。但是，由于存在制作工艺、比例和效果欠评估，仅个别实验室自制使用。主要问题为对照信号缺失，定位不准确；缺乏可供参考的形态学辨识和结构特征。并且伦理学禁止市场化。