[发明专利]一种果桑品种‘粤椹123’的SSR分子标记及其核心引物组、试剂盒和应用

权利要求书

1.一种用于鉴定果桑品种‘粤椹123’的SSR分子标记，其特征在于，包括SSR分子标记M10360和/或M29602；所述的SSR分子标记M10360的重复基序为(AT)_n，其中n≥6，其右侧序列如SEQ ID NO.6所示，其左侧序列如SEQ ID NO.5所示；所述的SSR分子标记M29602的重复基序为(GCA)_n，其中n≥6，其右侧序列如SEQ ID NO.8所示，其左侧序列如SEQ ID NO.7所示。

2.一种用于鉴定果桑品种‘粤椹123’的SSR分子标记的核心引物组，其特征在于，包括针对SSR分子标记M10360的引物和/或针对SSR分子标记M29602的引物：

所述的针对SSR分子标记M10360的引物：

M10360-F：5’-GAGTTCTTGAGGGGAAAGAGAAA-3’；

M10360-R：5’-AATTCCTGTGATCATCTGCCTTA-3’；

所述的引物M10360-F的5’端标记有荧光报告基团；

所述的针对SSR分子标记M29602的引物：

M29602-F：5’-ATGAACCCTCAGATGTTCTCAAT-3’；

M29602-R：5’-TTAATGATTCGACTCCGGTTTT-3’；

所述的引物M29602-F的5’端标记有荧光报告基团。

3.根据权利要求2所述的用于鉴定果桑品种‘粤椹123’的SSR分子标记的核心引物组，其特征在于，所述的荧光报告基团为FAM、HEX、TAMRA或ROX。

4.一种用于鉴定果桑品种‘粤椹123’的快速检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求2或3所述的SSR分子标记的核心引物组。

5.一种利用SSR分子标记鉴定果桑品种‘粤椹123’的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待测果桑样品的基因组DNA；

(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板，分别利用权利要求2或3所述的引物对M10360-F/M10360-R和M29602-F/M29602-R进行PCR扩增；

(3)对步骤(2)中的PCR扩增产物进行分型，对分型结果进行条带判别；若以引物对M10360-F/M10360-R为引物扩增得到的PCR扩增产物只有158bp和176bp两条特异性条带，以引物对M29602-F/M29602-R为引物扩增得到的PCR扩增产物只有150bp一条特异性条带，则表明待测果桑样品为‘粤椹123’，否则，则表明待测果桑样品为非‘粤椹123’。

6.根据权利要求5所述的利用SSR分子标记鉴定果桑品种‘粤椹123’的方法，其特征在于，步骤(2)所述的PCR扩增，其反应体系为20μL，包括：50ng/μL DNA模板0.5μL、10×PCRbuffer 2μL、25mM MgCl₂ 2μL、10mM dNTPs 0.5μL、5U/μL Taq DNA聚合酶0.2μL、10μM上游引物0.5μL、10μM下游引物0.5μL和ddH₂O 13.8μL；步骤(2)所述的PCR扩增，其反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火30s，每个循环降1℃，72℃延伸30s，循环10次；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸30s，循环30次；最后72℃延伸5min。

7.权利要求2或3所述的核心引物组或权利要求4所述的快速检测试剂盒在鉴定果桑品种‘粤椹123’中的应用。