[发明专利]猪大肠杆菌活疫苗冻干保护剂

权利要求书

1.一种猪大肠杆菌活疫苗冻干保护剂，其特征在于由如下质量份的组分组成：

50～200份脱脂乳、50～200份蔗糖、5～20份明胶、10～20份甘露醇和5～10份氯化钠。

2.根据权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，

由如下质量份的组分组成：脱脂乳200份、蔗糖200份、明胶20份、甘露醇20份和氯化钠7份；

或由如下质量份的组分组成：脱脂乳50份、蔗糖50份、明胶5份、甘露醇10份和氯化钠7份；

或由如下质量份的组分组成：脱脂乳100份、蔗糖100份、明胶10份、甘露醇15份和氯化钠9份；

或由如下质量份的组分组成：脱脂乳200份、蔗糖200份、明胶10份、甘露醇15份和氯化钠5份；

或由如下质量份的组分组成：脱脂乳200份、蔗糖200份、明胶5份、甘露醇10份和氯化钠10份；

或由如下质量份的组分组成：脱脂乳150份、蔗糖100份、明胶5份、甘露醇15份和氯化钠7份；

或由如下质量份的组分组成：脱脂乳150份、蔗糖200份、明胶15份、甘露醇20份和氯化钠10份。

3.防治猪大肠杆菌病的疫苗，其由猪大肠杆菌的菌悬液和权利要求1或2所述冻干保护剂的溶液制得。

4.根据权利要求3所述的疫苗，其特征在于，猪大肠杆菌的菌悬液中，菌体密度为500×10⁸cfu/ml。

5.根据权利要求3所述的疫苗，其特征在于，所述冻干保护剂溶液中包括水和如下质量分数的：5％～20％脱脂乳、5％～20％蔗糖、0.5％～2％明胶、1％～2％甘露醇和0.5％～1％份氯化钠。

6.根据权利要求3～6所述的疫苗，其特征在于，所述菌悬液和冻干保护剂溶液的体积比为1：(0.8～1.2)。

7.权利要求任一项所述的疫苗的制备方法，包括：

将权利要求1所述的猪大肠杆菌培养至OD600值不低于40，离心取菌体以生理盐水重悬至菌体密度为500×10⁸cfu/ml，然后与等体积冻干保护剂溶液混合，经冻干制得所述疫苗。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述冻干的程序包括：0℃～5℃进箱平衡30min，预冻阶段设置0.5℃/min速率至-40℃～50℃维持200min，升华阶段设置0.5℃/min速率至-5℃维持600min，解析干燥阶段设置1℃/min速率至25℃维持300min，过程真空压力控制0.1mbar。