[发明专利]用于获得免疫抑制性树突细胞的方法

权利要求书

1.用于诱导包含在体外量的哺乳动物对象血液样品中的单核细胞分化成免疫抑制性树突细胞的方法，所述方法包括至少以下步骤：

a)提供装置的流动室；

b)使所述体外量的所述哺乳动物对象血液样品通过所述流动室，从而向所述单核细胞施加剪切力；以及

c)在DNA交联剂优选8-MOP存在下使所述单核细胞暴露于UV光，这活化所述单核细胞并诱导其分化成免疫抑制性树突细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，

其中所述免疫抑制性树突细胞可由以下来鉴定：

i)通过PDL-1、GILZ、IDO、KMO、TGFβ和/或IL-10的表达提高；

ii)通过GILZ诱导的IL-10与IL-12p70之比的增加；和/或

iii)通过确定至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55或60种分子标志物的表达，所述分子标志物指示免疫刺激性树突细胞，其中优选地所述至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55或60种分子标志物可选自表1并且不示出表达提高；其中更优选地所述至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55或60种分子标志物包括PLAUR、NEU1、CTSB、CXCL16、ICAM1、MSR1、OLR1、SIRPA、TNFRSF1A、TNFSF14、TNFSF9、PMB22、CD40、LAMP3、CD80、CCR7、LOX1、CD83、ADAM Decysin、FPRL2、GPNMB和/或CD86；和/或

iv)对于LPS刺激的成熟的完全抗性。

3.根据权利要求1或2中任一项所述的方法，

其中

i)所述装置允许固定地或可调地调节流量；和/或

ii)所述装置允许调节选自包括温度和光暴露的组的至少一个参数；和/或

iii)其中通过与活化的血小板和/或血浆组分相互作用来活化所述单核细胞并诱导其分化成免疫抑制性树突细胞；和/或

iv)其中可以通过以下因素影响所述单核细胞的活化和分化成免疫抑制性树突细胞：所述流动室的设计和尺寸，所述单核细胞通过所述流动室的流量，在DNA交联剂如8-MOP存在或不存在下所述单核细胞暴露的光，单核细胞、血小板、血小板衍生因子和/或血浆组分通过所述流动室的温度，所述单核细胞、血小板、血小板衍生因子和/或血浆组分通过所述流动室的顺序，血浆组分涂布所述流动室之表面的密度，血小板和/或血小板衍生因子粘附于所述流动室之表面和/或所述流动室之血浆组分的密度，和/或单核细胞粘附于粘附在所述流动室之表面的所述血小板和/或血小板衍生因子和或血浆组分的密度。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，

其中所述方法还包括以下步骤：

i)在方法步骤b)之前，使血小板通过所述流动室的步骤，所述血小板可包含在所述体外量的所述哺乳动物对象血液中，或者所述血小板可以与包含至少单核细胞的所述哺乳动物对象血液样品分开提供；或者

ii)在方法步骤b)之前，使血浆组分通过所述流动室的步骤，所述血浆组分可包含在所述体外量的所述哺乳动物对象血液样品中，或者所述血浆组分可以与所述哺乳动物对象血液样品分开提供；或者

iii)在方法步骤b)之前，i)和ii)的步骤。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述体外量的所述哺乳动物对象血液样品不是通过单采血液成分术获得的；其中

i)所述体外量的所述哺乳动物对象血液样品为约10ml至约500ml所述哺乳动物对象的体外全血；

ii)其中所述体外量的所述哺乳动物对象血液样品通过从约10ml至约500ml所述哺乳动物对象的体外全血分离白细胞获得；和/或

iii)其中所述体外量的所述哺乳动物对象血液样品通过从约10ml至约500ml所述哺乳动物对象的体外全血分离血沉棕黄层获得。